HiMedia GM189-500G TCBS агар

Гранулированная селективная питательная среда HiMedia GM189-500G TCBS агар для выделения и культивирования патогенных Vibrio, включая Vibrio cholerae, из клинических, пищевых и водных образцов. Применяется в микробиологическом контроле пищевой продукции, клинических материалов и воды; приготовленную среду не автоклавируют.

Назначение

Среда предназначена для селективного выделения и культивирования Vibrio cholerae и других энтеропатогенных видов рода Vibrio, вызывающих пищевые токсикоинфекции, из клинических образцов и пищевых продуктов.

Типы образцов:

• Клинические образцы: фекалии и другие материалы.
• Образцы пищевой продукции.
• Образцы воды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 89,08 г среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте среду.
4. Охладите раствор до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

TCBS агар разработан Kobayashi и соавторами на основе селективной среды Nakanishi. Изначально среда предназначалась для выделения Vibrio cholerae и Vibrio parahaemolyticus, однако большинство видов рода Vibrio растёт на ней с образованием крупных полноценных колоний различных морфологических типов.

Среда также рекомендована Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) для селективного выделения Vibrio cholerae и Vibrio parahaemolyticus. Для выделения Vibrio cholerae обычно применяют предварительное обогащение в щелочной пептонной воде M618 с последующим высевом на TCBS агар.

Протеозопептон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми соединениями, витаминами группы B и другими необходимыми питательными веществами. Желчь, являющаяся производным желчных солей, и цитрат натрия подавляют рост грамположительных бактерий и колиформных микроорганизмов.

Тиосульфат натрия служит источником серы, которая в сочетании с цитратом железа позволяет выявлять образование сероводорода (H₂S). Для метаболизма видов рода Vibrio в состав среды введена сахароза как ферментируемый углевод. Vibrio, способные утилизировать сахарозу, образуют жёлтые колонии. Бромтимоловый синий и тимоловый синий выполняют функцию индикаторов pH. Щелочное значение pH среды улучшает восстановление Vibrio cholerae.

Штаммы Vibrio cholerae образуют на TCBS агаре жёлтые колонии вследствие ферментации сахарозы. Жёлтые колонии также формирует Vibrio alginolyticus. Vibrio parahaemolyticus не ферментирует сахарозу и поэтому образует сине-зелёные колонии; аналогичный цвет характерен для Vibrio vulnificus.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения и интерференции

1. Среду следует инокулировать большим количеством фекального материала, поскольку рост некоторых видов может подавляться в результате ферментации сахарозы и накопления кислот.
2. Отдельные изоляты Pseudomonas и Aeromonas также могут образовывать на TCBS агаре сине-зелёные колонии.
3. Ферментирующие сахарозу виды Proteus могут образовывать жёлтые колонии.
4. TCBS агар не подходит для проведения оксидазного теста видов рода Vibrio.
5. Некоторые штаммы Vibrio cholerae могут образовывать на TCBS агаре зелёные или бесцветные колонии вследствие замедленной ферментации сахарозы.
6. TCBS агар обладает высокой селективностью в отношении видов рода Vibrio. Любая колония на TCBS агаре, не продуцирующая H₂S, может рассматриваться как предположительно положительная на Vibrio.
7. Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические тесты.

Контроль качества

Ожидаемые характеристики среды достигаются при приготовлении и применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

• Внешний вид: гранулированная среда светло-жёлтого или светло-коричневого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель голубовато-зелёного цвета в чашках Петри.
• Реакция: реакция 8,9%-ного водного раствора при 25 °C.
• pH: 8,40–8,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Специфичность

Дополнительные микробиологические испытания