HiMedia GM188-500G Основа D.T.M. агара (агар для тестирования дерматофитов)

Гранулированная питательная среда HiMedia GM188-500G Основа D.T.M. агара (агар для тестирования дерматофитов) предназначена для селективного выделения дерматофитов. Применяется для анализа клинических образцов кожи, волос и ногтей; хранится при 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.

Назначение

Основа D.T.M. агара предназначена для селективного выделения дерматофитов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 20,10 г препарата в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки CCG (FD015).
6. Тщательно перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Дерматофиты представляют собой отдельную группу грибов, поражающих волосы, кожу и ногти человека и животных и вызывающих различные поверхностные грибковые инфекции, известные как дерматомикозы. Большинство поверхностных грибковых инфекций вызывают дерматофиты родов Trichophyton, Microsporum и Epidermatophyton.

Основа D.T.M. агара разработана Taplin как селективная и дифференциальная среда для обнаружения и идентификации дерматофитов. Идентификацию дерматофитов на этой среде проводят предположительно по морфологии и образованию щелочных метаболитов.

Комбинация трёх противомикробных веществ — циклогексимида, хлортетрациклина и гентамицина — подавляет рост бактерий, сапрофитных дрожжей и плесневых грибов. Предположительно дерматофиты идентифицируют по общей морфологии колоний и образованию щелочных метаболитов, повышающих pH и вызывающих изменение окраски индикатора фенолового красного с жёлтой на розово-красную.

Соевый пептон обеспечивает азотистые и углеродистые соединения, необходимые для роста. Глюкоза служит источником энергии. Индикатор pH феноловый красный используется для выявления образования аминов.

Циклогексимид (FD) подавляет большинство сапрофитных грибов. Гентамицин подавляет грамотрицательные бактерии, включая виды Pseudomonas. Хлортетрациклин подавляет широкий спектр грамположительных и грамотрицательных бактерий.

Наличие роста на среде позволяет предположительно идентифицировать дерматофиты. D.T.M. агар способствует выделению и раннему распознаванию представителей родов Microsporum и Trichophyton по отчётливому изменению цвета среды с жёлтого на красный. Быстрорастущие виды могут вызвать полное изменение цвета в течение 3 суток, тогда как у медленнорастущих видов изменение цвета происходит пропорционально дольше. Недерматофиты можно распознать по отсутствию изменения цвета среды.

Некоторые сапрофиты, дрожжи и бактерии также изменяют цвет среды с жёлтого на красный, однако их можно отличить по морфологии колоний. Полная классификация дерматофитов зависит от результатов микроскопического исследования, а также биохимических и серологических тестов.

Тип образцов

Клинические образцы:

• соскобы кожи;
• поражённые участки волос;
• материал из поражений ногтей;
• чешуйчатые поражения кожи головы.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами соблюдайте соответствующие методики обращения с образцами согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Руководствуйтесь требованиями безопасности, приведёнными в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Ложноположительные реакции могут возникать при интерпретации результатов после более чем 6 суток инкубации.
2. При посеве материала из неактивной области поражения возможны ложноотрицательные реакции.
3. При высокой степени загрязнения образца сапрофитные грибы могут вызвать изменение цвета среды.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Однородная гранулированная среда от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем, содержащим 2,0 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель оранжево-красного цвета со слабой опалесценцией.

Реакция среды

Реакция 4 % водного раствора по массе при 25 °C: pH 5,5 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 5,30–5,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 25–30 °C в течение 6 суток с добавлением селективной добавки CCG (FD015).

Обозначения: * — соответствующие номера WDCM; # — ранее известен как Aspergillus niger.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: GM188-500G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Форма препарата: гранулы
• Тип продукта: гранулированный
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Масса: 500 г
• Конечный pH при 25 °C: 5,5 ± 0,2
• Диапазон pH: 5,30–5,70

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого препарата: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке
• После вскрытия храните препарат в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните препарат в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики сохраняются на оптимальном уровне при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительный технический контекст

Среда сочетает селективное подавление сопутствующей микрофлоры противомикробной комбинацией с дифференциальным выявлением щелочных метаболитов по изменению цвета фенолового красного с жёлтого на розово-красный.

Контрольные культуры и интерпретация

На среде с добавкой CCG (FD015) после 6 суток инкубации при 25–30 °C ожидается хороший рост Microsporum audouinii и Trichophyton mentagrophytes с изменением цвета среды на розово-красный. Для Aspergillus brasiliensis и Pseudomonas aeruginosa ожидается отсутствие или слабый рост; Candida albicans демонстрирует хороший рост без указанного изменения цвета среды.