HiMedia GM1632-500G Агар для тестирования противомикробных ингибиторов, pH 8.0

Сухая гранулированная среда HiMedia GM1632-500G Агар для тестирования противомикробных ингибиторов (pH 8,0). Применяется для анализа остаточного содержания противомикробных компонентов в образцах мяса и органов с использованием тест-культур Bacillus subtilis (ATCC 6633) и Micrococcus luteus (ATCC 9341).

Принцип измерения

Среда предназначена для выявления антимикробных соединений (например, хлора или органических кислот), используемых для санитарной обработки мясных продуктов. Анализ проводится методом диффузии в агаре или по методу четырех чашек EEC (EEC Four-Plate-Test).

При методе диффузии небольшие кусочки образца мяса помещаются на посеянный агар; если в образце присутствуют антимикробные компоненты, они диффундируют в среду и подавляют рост тест-организмов, создавая зону торможения роста.

Различные антибиотики имеют разную активность в зависимости от pH среды. Агар GM1632 с pH 8,0 оптимален для анализа таких компонентов, как стрептомицин. Для анализа пенициллина G используется среда с pH 6,0 (M1631), для сульфаниламидов — с pH 7,2 (M1601).

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворить 26,07 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.

Посев и инкубация

1. В 1 литр стерильной охлажденной среды (50–56 °C) внести 1 мл суспензии спор Bacillus subtilis или суспензии Micrococcus luteus (концентрация $10^6$ КОЕ/мл).
2. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.
3. Для метода диффузии: поместить кусочки образца мяса на поверхность посеянного агара.
4. Для метода четырех чашек EEC:
   • В одну половину чашки асептически поместить два небольших фрагмента (2–8 мм) образца мяса или органа.
   • Во вторую половину чашки поместить контрольные диски со стандартным антибиотиком (например, стрептомицин 10 мкг).
5. Инкубировать чашки в течение 18–24 часов при температуре:
   • 30 °C для Bacillus subtilis;
   • 37 °C для Micrococcus luteus.

Интерпретация результатов

После инкубации измеряют диаметр зоны торможения (расстояние от края фрагмента ткани до границы роста организма).

• Положительный результат: зона торможения $\ge$2 мм.
• Сомнительный результат: зона торможения <2 мм.
• Контроль: стандартный диск должен демонстрировать зону торможения не менее 6 мм.

Технические характеристики

Состав, г/л

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: гранулированная среда от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,3%-м агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 8,00 (2,61% в/в водный раствор при 25 °C).

Культуральные характеристики

Характеристики роста и зоны торможения определены после инкубации в течение 18–24 часов (30 °C для B. subtilis и 37 °C для M. luteus).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.