Агар для выделения клостридий дифференциальный усиленный HiMedia GM1603-500G (уп/500 гр)

Дифференциальный усиленный гранулированный агар для выделения клостридий HiMedia GM1603-500G (уп/500 гр) — питательная среда с конечным значением pH 7,1 ± 0,2. Агар предназначен для культивирования и количественного определения Clostridia в воде и клинических образцах, включая фекалии; почернение среды является предположительным признаком сульфитредуцирующих клостридий.

Назначение

Питательная среда предназначена для выделения, культивирования и количественного определения Clostridia из проб воды и клинического материала, включая фекалии.

Среду применяют:

• для определения Clostridium spp. в воде;
• совместно с мембранным фильтром для подсчёта Clostridium thermosaccharolyticum в сахаре;
• для исследования кишечной флоры с добавлением крови;
• для определения и подсчёта Lactobacillus и Bacteroides в фекалиях человека и животных.

Агар поставляется в гранулированной форме. Гранулы быстро растворяются, имеют увеличенный срок годности по сравнению с мелкодисперсными порошками, не пылят и снижают риск попадания частиц в дыхательные пути персонала.

Принцип действия и интерпретация

Гидролизат казеина, пептон, экстракт говядины, дрожжевой экстракт и другие компоненты среды обеспечивают микроорганизмы источниками азота, необходимыми питательными веществами и факторами роста. Глюкоза служит источником углерода и энергии.

Бисульфит натрия и железа аммонийного цитрат формируют индикаторную систему восстановления сульфита. В результате восстановления сульфита образуются колонии чёрного цвета и происходит почернение среды.

Резазурин является окислительно-восстановительным индикатором и помогает выявлять анаэробные условия в среде.

Почернение среды служит предположительным признаком присутствия сульфитредуцирующих клостридий. Для полной идентификации необходимы дополнительные биохимические и серологические исследования.

Нагревание одной из параллельных проб при 80 ± 1 °C в течение 10 мин предназначено для уничтожения вегетативных клеток. Почернение проб, подвергнутых тепловому воздействию, подтверждает наличие clostridia.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик среды.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 42,50 г среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 psi (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Методика проведения анализа

Подготовка образца и серийных разведений

1. Измельчите исследуемый материал в гомогенизаторе типа «стомacher».
2. Приготовьте последовательные десятикратные разведения в растворе Рингера четвертной концентрации (M525) или в 0,1% пептонной воде (M028).
3. Перенесите 1 мл или 0,1 мл соответствующего разведения — в зависимости от количества исходной пробы — на дно пробирок с расплавленным дифференциальным усиленным агаром для клостридий, охлаждённым до 45–50 °C.
4. Приготовьте две параллельные пробирки по одной и той же процедуре.
5. Плотно закройте пробирки крышками.

Тепловая обработка и инкубация

1. Одну из двух параллельных пробирок нагрейте до 80 ± 1 °C в течение 10 мин для уничтожения вегетативных клеток.
2. Инкубируйте пробирки после тепловой обработки и без тепловой обработки при 35 ± 1 °C в течение 5 суток.
3. Оцените почернение пробирок как признак восстановления сульфита.
4. Пробы без тепловой обработки, в которых наблюдается почернение, пересейте на дифференциальный усиленный агар для клостридий с целью подтверждения.

Альтернативные способы посева

• Образцы можно наносить на поверхность агаризованной среды методом штрихового посева, поверхностного распределения или заливки.
• Среду в высоком агаре можно инокулировать уколом.
• Дифференциальный усиленный агар для клостридий можно использовать для заливки мембранного фильтра при мембранной фильтрации.
• Чашки и пробирки инкубируют при 35 °C ± 2 °C в течение 24–48 ч в анаэробных условиях.

Типы образцов

• Образцы воды.
• Клинические образцы — фекалии.

Сбор и обращение с образцами

Для проб воды используйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным методическим рекомендациям.

Для клинических образцов выполняйте сбор и обработку материала в соответствии с действующими руководствами и местными стандартами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• При необходимости обращайтесь к индивидуальным паспортам безопасности.

Ограничения применения

1. Для полной идентификации микроорганизмов необходимы дополнительные биохимические и серологические исследования.
2. Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на этой среде.

Контроль качества

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Внешний вид

Кремовый или жёлтый гранулированный препарат.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5% агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель светло-розового цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 4,25% масс./об. при 25 °C.

Значение pH

pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают в анаэробной атмосфере после инкубации при 30–35 °C в течение 1 недели.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Наименование: агар для выделения клостридий дифференциальный усиленный.
• Модель: GM1603-500G.
• Производитель: HiMedia.
• Тип питательной среды: дифференциальная.
• Форма выпуска: гранулированная.
• Физическая форма: гранулы.
• Назначение изделия: агар.
• Упаковка: HDPE (