HiMedia GM1601-500G Агар для тестирования противомикробных ингибиторов, pH 7.2

Сухая гранулированная среда HiMedia GM1601-500G «Агар для тестирования противомикробных ингибиторов, pH 7,2» предназначена для анализа остаточного содержания антимикробных компонентов в образцах мяса и органов. В качестве тест-организма используется Bacillus subtilis (ATCC 6633); вес упаковки составляет 500 г.

Область применения

Среда рекомендуется для выявления остатков антимикробных соединений (например, сульфаниламидов) в мышечных тканях и органах животных. Анализ проводится методом диффузии в агаре или с использованием метода четырех чашек (EEC Four-Plate-Test).

Принцип измерения и интерпретация

Для санитарной обработки мясных продуктов используются хлор и органические кислоты. Эффективность этих соединений зависит от их концентрации.

Метод диффузии в агаре

Небольшие кусочки образца мяса помещаются на посеянные чашки с агаром и инкубируются. При наличии антимикробных компонентов они диффундируют в среду, подавляя рост тест-организмов, что приводит к образованию зоны задержки роста. Для анализа различных антибиотиков используются среды с разным значением pH, так как они имеют разные диапазоны оптимальной активности:

• Пенициллин G: оптимально при pH 6,0 (среда GM1631/M1631).
• Сульфаниламиды: оптимально при pH 7,2 (данная среда GM1601/M1601).
• Стрептомицин: оптимально при pH 8,0 (среда GM1632/M1632).

Для повышения чувствительности среды к остаткам сульфаниламидов в образцах мяса/органов в состав добавляется триметоприм (50 мкг).

Метод четырех чашек (EEC Four-Plate-Test)

1. В расплавленный и охлажденный агар вносится суспензия спор Bacillus subtilis, смесь тщательно перемешивается и разливается по чашкам Петри.
2. В одну половину посева асептически помещаются небольшие кусочки (2–8 мм) образца мяса или органа на определенном расстоянии друг от друга.
3. Во вторую половину чашки в качестве контроля помещаются стандартные диски с антибиотиком (для сульфаниламидов используется диск 0,5 мкг).
4. Чашки инкубируют при 30 °C в течение 18–24 часов.
5. Измеряется зона ингибирования между краем ткани и границей роста организма.

Интерпретация результатов:

• Положительный результат: зона ингибирования $\ge$ 2 мм.
• Сомнительный результат: зона < 2 мм.
• Контрольный диск должен демонстрировать зону ингибирования минимум 6 мм.

Состав

Состав, г/л:

Пептон служит источником углерода, азота и факторов роста. Натрия хлорид поддерживает осмотический баланс, а фосфатная соль обеспечивает буферную емкость среды.

Методика приготовления

1. Суспендировать 25,34 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Внести 1 мл суспензии спор Bacillus subtilis на литр стерильной охлажденной среды.
6. Добавить 50 мкг триметоприма на литр среды.
7. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Основные параметры

• Продукт: гранулированная среда
• Физическая форма: гранулы
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Происхождение компонентов: животное
• Цвет среды: от кремового до желтого
• Вид готового геля: светло-янтарный, от прозрачного до слегка опалесцирующего
• Желирование: плотный гель (сопоставимо с 1,3% агаром)
• pH 2,53% водного раствора при 25 °C: 7,20

Культуральные характеристики

Характеристики роста и зоны ингибирования наблюдались для B. subtilis после инкубации при 30 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: указан на этикетке.