HiMedia GM1592-500G Основа бульона Болтона

Сухая основа селективного бульона Болтона HiMedia GM1592-500G для обогащения культур Campylobacter из пищевых продуктов, кормов и воды. Состав и показатели эффективности среды соответствуют спецификациям ISO 10272-1:2017, ISO 17995:2019(E) и ISO 11133:2014(E) /Amd.: 2020.

Принцип измерения

Среда предназначена для селективного обогащения видов Campylobacter, которые вызывают диарею различной степени тяжести (основные возбудители: C. jejuni, C. coli и C. lari). Селективность обеспечивается добавлением коктейля антибиотиков: цефоперазона, ванкомицина, триметоприма и амфотерицина B.

• Ванкомицин, цефоперазон и триметоприм подавляют рост грамположительных и грамотрицательных бактерий.
• Амфотерицин B значительно снижает рост дрожжей и плесневых грибов.
• Пептон, гидролизат лактальбумина и дрожжевой экстракт способствуют реанимации сублетально поврежденных клеток Campylobacter.

Область применения

Применяется для выделения и количественного определения Campylobacter spp. в следующих образцах:

• Пищевые продукты и корма для животных.
• Образцы воды (включая термотолерантные виды Campylobacter).
• Экологические пробы из зон производства пищевой продукции.

Состав

Спецификация ISO — Бульон Болтона

GM1592 — Основа бульона Болтона (гранулированная)

Добавки, вносимые после автоклавирования

FD231 — Селективная добавка Болтона (состав 2 виал)

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 13,80 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте содержимое одной регидратированной виалы селективной добавки Болтона (FD231) и 25 мл стерильной лизированной дефибринированной крови лошади. Примечание: Кровь лошади может быть лизирована сапонином или путем замораживания с последующим оттаиванием.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным пробиркам или колбам.

Процедура анализа

1. Подготовка первичной суспензии: Смешайте 10 г или 10 мл исследуемой порции с 90 мл бульона Болтона.
2. Инкубация:
   • Первичная инкубация: в микроаэрофильной атмосфере при 37 °C в течение 5 $\pm$ 1 часа.
   • Вторичная инкубация: при 41,5 °C в течение 44 $\pm$ 4 часов.
3. Посев: С помощью стерильной петли объемом 10 мкл перенесите культуру из бульона на поверхность агара mCCD (M887I).
4. Инкубация посева: Пластины инкубируют при 41,5 °C в микроаэрофильной атмосфере в течение 44 $\pm$ 4 часов.
5. Подтверждение: Для окончательной идентификации проводят биохимические и серологические тесты.

Технические характеристики

• Вес: 500 г
• Внешний вид: гранулированная среда от светло-желтого до коричневато-желтого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды:
  • База: коричневато-желтый прозрачный или слегка опалесцирующий раствор
  • После добавления крови лошади: непрозрачный раствор от красного до коричневого цвета
• pH (2,76% водный раствор при 25 °C): 7,4 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Происхождение компонентов: животные
• Форма выпуска: гранулы
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Проверка продуктивности и селективности проводится с использованием добавки FD231 при инкубации в микроаэрофильной атмосфере (37 $\pm$ 1 °C в течение 5 $\pm$ 1 ч, затем 41,5 $\pm$ 1 °C в течение 44 $\pm$ 4 ч) с последующим пересевом на агар M887I (41,5 °C, 44 $\pm$ 4 ч).

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен. После вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.

Ограничения и меры предосторожности

• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны на среде.
• Рекомендуется проводить валидацию каждой партии среды.
• Работа с культурами должна осуществляться в соответствии с правилами надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Утилизация: Отработанные среды и материалы, контактировавшие с образцами, подлежат деконтаминации путем автоклавирования и/или сжигания.