HiMedia GM1578-500G Основа бульона BLE (буферный бульон для обогащения листерий)

Основа бульона BLE (буферный бульон для обогащения листерий) HiMedia GM1578-500G представляет собой гранулированную сухую среду для селективного обогащения культур Listeria monocytogenes. Применяется для анализа проб пищевых продуктов и молочной продукции; обладает повышенной буферной емкостью для совместимости с ДНК-зондированием и другими высокочувствительными методами анализа.

Принцип измерения

Среда предназначена для первичного обогащения проб с низким содержанием L. monocytogenes. Буферная система позволяет поддерживать стабильный pH, что критично для последующего использования чувствительных методов детекции.

Компоненты среды:

• Триптон и соевый пептон: источники аминокислот и сложных азотистых соединений.
• Декстроза (глюкоза): основной источник энергии.
• Пируват натрия: способствует реанимации поврежденных микроорганизмов.
• Фосфаты: обеспечивают буферную емкость среды.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Экстракт дрожжей: источник витаминов группы B.

Селективность достигается путем добавления антимикробных агентов (в составе селективной добавки ANC): циклогексимид подавляет рост сапрофитных грибов, налидиксовая кислота ингибирует грамотрицательные организмы, а акрифлавин подавляет рост большинства грамположительных микроорганизмов.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворить 24,03 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить содержимое одного флакона селективной добавки ANC (FD063I).
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным пробиркам или колбам.

Процедура выделения L. monocytogenes (согласно методике FDA)

1. Внести исследуемую пробу молочного продукта в бульон для обогащения.
2. Инкубировать при 30 °C в течение 4 часов без добавления селективной добавки.
3. По истечении 4 часов добавить селективную добавку ANC и продолжить инкубацию при 30 °C еще 44 часа.
4. Через 24 и 48 часов после начала общего цикла инкубации произвести пересев обогащенной культуры на следующие среды:
   • Основа среды Оксфорд для листерий (M1145);
   • Агар LPM (M1228) или идентификационный агар для листерий PALCAM (M1064).
5. Инкубировать посевы при 35 °C в течение 24–48 часов.
6. Отобрать предполагаемые колонии Listeria и провести их очистку на агаре с триптоном, соевым пептоном и экстрактом дрожжей (M1214).
7. Очищенные изоляты подвергнуть биохимическим тестам для подтверждения вида L. monocytogenes.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Вес: 500 г
• Физическая форма: гранулы
• Цвет среды: от кремового до желтого
• Вид готового раствора: желтый, прозрачный или слегка опалесцирующий с небольшим осадком
• Диапазон pH: 7,10–7,50
• Происхождение компонентов: животное
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Характеристики определены при использовании селективной добавки ANC (FD063I) после инкубации при 30 °C в течение 24–48 часов.

*Соответствующие номера WDCM.

Область применения и ограничения

Применяется для анализа проб пищевых продуктов и молочной продукции. Для окончательной идентификации микроорганизма необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия плотно закрывать крышку во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и образцами необходимо использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, защитная одежда, очки, маска) и соблюдать правила микробиологической безопасности. Все загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией.