HiMedia GM1544-500G Основа среды Кинга B

Сухая питательная среда HiMedia GM1544-500G Основа среды Кинга B для неселективного выделения, культивирования и стимуляции выработки пигментов видами Pseudomonas. Применяется для анализа проб пищевых продуктов и воды; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда Кинга B основана на рецептуре King et al. и специально разработана для стимуляции выработки флуоресцеина. Pseudomonas aeruginosa вырабатывает два основных типа пигментов: пиоцианин (зелёный) и флуоресцеин (флуоресцентно-жёлтый), а также пиорубин (красно-коричневый), что является характерным свойством и облегчает выделение данных микроорганизмов из клинического материала, пищевых продуктов и косметических образцов.

В состав среды входят:

• Протеозо-пептон: обеспечивает углеродные и азотистые соединения для роста бактерий.
• Глицерин: служит источником энергии и усиливает выработку пигментов.
• Сульфат магния: способствует усилению пигментации.
• Дикалийфосфат: увеличивает содержание фосфора, что стимулирует выработку флуоресцентного пигмента.

Выработка пигментов (особенно нефлуоресцентного синего пиоцианина) значительно усиливается в условиях дефицита железа, поэтому среда Кинга B не содержит добавок железа.

Методика приготовления и использования

1. Растворите 42,23 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 15 мл глицерина.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов, тщательно перемешайте.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Асептически разлейте в стерильные чашки Петри.

Особенности инокуляции и инкубации

• Для инокуляции рекомендуется использовать культуры, предварительно выращенные на среде Кинга A (инкубация в течение ночи при 37 °C, затем при комнатной температуре в течение 6 дней).
• При использовании среды Кинга B инкубацию проводят при 37 °C в течение 6 дней.
• Результаты следует фиксировать через 18–24 часа; более поздний срок может привести к ошибочным результатам.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Дополнительные параметры:

Контроль качества

• Внешний вид: однородный гранулированный порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 2,0 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-жёлтый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 4,22 % (масса/объём) водного раствора (содержащего 1,5 % об. глицерина) при 25 °C составляет 7,2 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Область применения

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• Пробы пищевых продуктов (сбор и обработка согласно соответствующим руководствам).
• Пробы воды (сбор и обработка согласно руководствам и местным стандартам).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Меры предосторожности: из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предупреждения

• Различные штаммы микроорганизмов могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
• Рекомендуется проводить валидацию среды для конкретных микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа (COA), исходя из уникальных требований пользователя.
• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической лабораторной практики, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Контаминированные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.