HiMedia GM1543-500G Основа среды Кинга A

Гранулированная питательная среда HiMedia GM1543-500G Основа среды Кинга A производства HiMedia предназначена для невыборочного выделения и культивирования видов Pseudomonas с конечным значением pH 7,3 ± 0,1. Основа применяется для продукции пиоцианина и пиорубина из клинических образцов, воды, пищевых продуктов и косметических проб; перед инокуляцией культуры выдерживают в среде Кинга A при 37 °C в течение ночи, затем при комнатной температуре 6 дней.

Назначение

Основа среды Кинга A предназначена для:

• невыборочного выделения видов Pseudomonas;
• культивирования видов Pseudomonas;
• индукции продукции пигментов, преимущественно пиоцианина и пиорубина.

Среда может применяться для выделения видов Pseudomonas из клинического материала, пищевых продуктов, косметических проб и воды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Методика приготовления

1. Взвесьте 46,64 г сухой гранулированной среды.
2. Суспендируйте препарат в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Асептически разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Pseudomonas aeruginosa способна продуцировать два типа пигментов — пиоцианин и флуоресцеин. Это характерное свойство помогает выделять Pseudomonas из клинического материала.

Кингом также был описан дополнительный пигмент — пиорубин. Пиоцианин имеет зелёную окраску, флуоресцеин — флуоресцирующую жёлтую, а пиорубин — красно-коричневую. Одни штаммы продуцируют все перечисленные пигменты, другие — один или два из них.

P. aeruginosa может быть идентифицирована на среде Хью—Лейфсона (M826). Основа среды Кинга A особенно подходит для продукции пиоцианина и пиорубина. Состав среды основан на рецептуре King и соавторов.

Протеозопептон обеспечивает бактерии углеродистыми и азотистыми соединениями, необходимыми для роста. Глицерин служит источником энергии и одновременно усиливает продукцию пигментов. Хлорид магния, сульфат калия и сульфат магния также усиливают продукцию пигментов.

Пигменты и/или их производные, образуемые видами Pseudomonas, выполняют функцию сидерофоров в системах поглощения железа бактериями. Поэтому их продукция существенно усиливается в условиях дефицита железа.

Для инокуляции используют свежие культуры, выращенные на среде Кинга A: инкубируют их в течение ночи при 37 °C, затем выдерживают при комнатной температуре 6 дней.

Типы образцов

• Клинические образцы: гной, моча.
• Образцы воды.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяют соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.

Для образцов воды используют соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• Сухую и приготовленную среду должны обрабатывать только обученные сотрудники.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости обращайтесь к руководствам по безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Для инокуляции используют свежие культуры, выращенные на среде Кинга A, с инкубацией в течение ночи при 37 °C и последующей выдержкой при комнатной температуре в течение 6 дней.
2. Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к росту и могут демонстрировать различные характеристики роста на этой среде.

Технические характеристики

• Форма выпуска: гранулированный порошок.
• Физическая форма: гранулы.
• Назначение изделия: основа питательной среды.
• Происхождение компонентов: животное.
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE).
• Масса: 500 г.
• Температура хранения закрытого продукта: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Конечное значение pH: 7,3 ± 0,1.
• Диапазон pH: 7,20–7,40.
• Расчётная концентрация водного раствора для определения реакции: 4,6 % м/о.
• Содержание глицерина в растворе для определения реакции: 1,0 % об./об.

Контроль качества

Внешний вид

Гранулированный, сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакцию определяют для водного раствора с концентрацией 4,6 % м/о, содержащего 1,0 % об./об. глицерина, при 25 °C.

• Значение pH: 7,3 ± 0,1.

pH

• Диапазон: 7,20–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.
^ Ранее обозначался как Pseudomonas aeruginosa.

Оценка эффективности

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

• Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия бутылку необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности препарата.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Для сохранения рабочих характеристик используйте продукт в пределах указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установ