Агар обогащенный для клостридий HiMedia GM154-500G (уп/500 гр)

Гранулированная питательная агаровая среда Агар обогащенный для клостридий HiMedia GM154-500G (уп/500 гр) производства HiMedia предназначена для культивирования клостридий и других анаэробных микроорганизмов. Среда применяется для подсчёта клостридий методом посева в глубину и получения высоких выходов жизнеспособных клеток, но в исходном составе не является селективной.

Назначение и область применения

Среда используется для:

• культивирования и подсчёта видов Clostridium и других анаэробных бактерий;
• получения роста максимального количества жизнеспособных клостридий при низком содержании микроорганизмов в исследуемом материале;
• выращивания анаэробных и факультативных бактерий;
• изучения спорообразующих анаэробов, включая Clostridium butyricum, присутствующих в сыре;
• подсчёта клостридий методом разведений в пробирках;
• приготовления чашек для выделения клостридий;
• определения количества клостридий в пищевых продуктах;
• проведения исследований с вегетативными клетками Clostridium perfringens.

На среде также могут расти другие спорообразующие анаэробы, стрептококки и лактобактерии. Богатый состав среды не обеспечивает селективности. Для придания среде селективных свойств добавляют 15–20 мг полимиксина B на 1 л готовой среды; используется реагент FD003.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия

Пропись полужидкой обогащённой клостридиальной среды разработана Hirsch и Grinstead для эффективного выращивания клостридий из небольших объёмов или малых количеств исследуемого материала с получением повышенного количества жизнеспособных клеток. Твёрдая агаровая версия среды применялась для развития вегетативных клеток Clostridium perfringens в рамках аналитических исследований.

Функции компонентов:

• ферментативный гидролизат казеина и мясной экстракт служат источниками углерода, азота, витаминов и минеральных веществ;
• дрожжевой экстракт обеспечивает витаминами группы B, стимулирующими рост бактерий;
• глюкоза является источником углеводов и ферментируемым субстратом;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды;
• растворимый крахмал в низких концентрациях обезвреживает побочные продукты метаболизма;
• гидрохлорид цистеина действует как восстановитель;
• ацетат натрия выполняет функцию буфера;
• агар-агар формирует плотную гелевую основу.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 51,00 г сухой гранулированной среды и суспендируйте в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения и полностью растворите среду.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри или распределите необходимым способом.

Методика подготовки образцов и проведения анализа

Исследуемый материал гомогенизируют в мешалочном гомогенизаторе, после чего готовят последовательные разведения. Для количественного определения применяют метод посева в глубину с заливкой расплавленной средой.

Инкубацию проводят в анаэробной атмосфере. При использовании пробирок после затвердевания обогащённой клостридиальной среды пробирки немедленно покрывают герметизирующим анаэробным агаром.

Контроль качества

Внешний вид и свойства готовой среды

• Внешний вид сухой среды: гранулированная однородная сыпучая масса кремового или жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри.
• Реакция: реакция 5,1%-ного водного раствора при 25 °C.
• pH: 6,60–7,00.
• Конечное значение pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают в анаэробной атмосфере после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

Технические характеристики

• Наименование: агар обогащённый для клостридий.
• Артикул: GM154-500G.
• Производитель: HiMedia.
• Тип питательной среды: дифференциальная.
• Назначение изделия: агар.
• Форма выпуска: гранулированная.
• Физическая форма: гранулы.
• Происхождение: животное.
• Масса упаковки: 0,5 кг.
• Тип упаковки: флакон из ПЭВП (HDPE).
• Конечное значение pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.
• Концентрация раствора для определения реакции: 5,1 % масс./объём.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.
• Сертификат: ФСЗ 2099/03706.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухого порошка: при температуре ниже +30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения готовой среды: +2…+8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• Упаковка: непрозрачный водоотталкивающий пластиковый флакон с навинчивающимся колпачком и внутренней крышкой.
• Этикетка: на русском языке.

В оригинальных условиях применения также указано хранение сухого порошка при температуре ниже +25 °C в плотно закрытом флаконе; готовую среду хранят при +2…+8 °C.

Регистрация

Зарегистрировано в Министерстве здравоохранения и социального развития Российской Федерации. Регистрационное обозначение: ФСЗ 2099/03706.

Техническое отличие

Гранулированная форма среды отличается от порошковых форм меньшим пылеобразованием и предназначена для приготовления среды с дозировкой 51,00 г на 1000 мл дистиллированной воды; селективность может быть получена только дополнительным внесением полимиксина B.

Комплект поставки

• Агар обогащённый для клостридий HiMedia GM154-500G — 0,5 кг в упаковке.