HiMedia GM1482-500G Основа модифицированной полужидкой среды RV

Основа модифицированной полужидкой среды RV HiMedia GM1482-500G (производство HiMedia) представляет собой гранулированную питательную среду для выделения подвижных видов Salmonella. Применяется для анализа клинических, пищевых и environmental-образцов; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда предназначена для изоляции подвижных штаммов Salmonella из различных типов проб. Селективность обеспечивается сочетанием нескольких факторов:

• Малахитовый зеленый и новобиоцин (добавляется в виде supplements FD193) подавляют рост большинства грамположительных и многих других бактерий.
• Высокое осмотическое давление (за счет содержания MgCl₂) и низкий уровень pH создают условия, при которых Salmonella сохраняют жизнеспособность лучше других микроорганизмов.
• Полужидкая консистенция позволяет дифференцировать подвижные штаммы от неподвижных.

Подвижные бактерии мигрируют в селективной среде, создавая вокруг места инокуляции матовые ореолы (зоны) роста. Данная среда не подходит для обнаружения неподвижных штаммов Salmonella.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворите 32,95 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 115 °C в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C и асептически добавьте содержимое одного флакона селективной добавки IMRV/RV Selective Supplement (FD193).
5. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри или пробиркам (для приготовления столбиков).

Важное примечание: Подвижность Salmonella может быть значительно снижена при чрезмерном высыхании поверхности агара. Чашки должны быть хорошо высушены перед использованием; видимая влага на крышках или поверхности агара должна быть удалена.

Процедура посева и инкубации

1. Нанесите по 3 капли (0,1 мл) культуры предварительного обогащения (возрастом 16–20 часов) отдельными точками на поверхность высушенной среды.
2. Инкубируйте чашки в вертикальном положении при 42 °C не более 24 часов в аэробных условиях.
3. Оцените результат: подвижные бактерии образуют матовый ореол или зону роста, исходящую из точки инокуляции. Колонии Salmonella имеют соломенно-желтый цвет.
4. Для подтверждения чистоты культуры и проведения дальнейших биохимических и серологических тестов делают субкультуры с внешнего края ореола.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: гранулированная среда от светло-желтого до светло-голубого цвета.
• Желирование: полужидкое, сопоставимо с гелем 0,26 % агара.
• Цвет и прозрачность готовой среды: голубоватый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 5,5 ± 0,2 (водный раствор 3,29 % м/об при 25 °C).
• Диапазон pH: 5,30–5,70.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при различных температурах в течение 18–24 ч с добавлением селективной добавки IMRV/RV Selective Supplement (FD193).

Область применения и совместимость

Среда используется для выделения подвижных видов Salmonella. Рекомендуется использовать в комбинации с другими методами:

• Для обогащения: бульон селенитовый F (GM052/M052).
• Для изоляции: агар XLD (GM031/M031).
• Для повышения степени восстановления при субкультивировании: агар XLD (GM031/M031) или маннит-лизин агар (M1071).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: до даты, указанной на этикетке.