Основа бульона Фрейзера HiMedia GM1327-500G (уп/500 гр)

HiMedia·Арт.: 0017912·Арт. произв.: GM1327-500G

Основа бульона Фрейзера HiMedia GM1327-500G (уп/500 гр)

Name: Основа бульона Фрейзера HiMedia GM1327-500G (уп/500 гр)
Brand: HiMedia
SKU: 0017912
Price: 16056 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ16 056 руб.

Элективная среда Основа бульона Фрейзера HiMedia GM1327-500G (уп/500 г) предназначена для первичного и вторичного обогащения, выделения и подсчета Listeria monocytogenes в пищевых продуктах и кормах для животных. Состав и показатели эффективности среды соответствуют спецификациям ISO 11290-1:2017, ISO 11290-2:2017 и ISO 11133:2014 (E) /Amd.: 2020.

Описание

Принцип измерения

Среда разработана по формуле Fraser и Sperber для обеспечения оптимальных условий роста листерий. Пептон, триптон, дрожжевой и мясной экстракты делают среду высокопитательной, обеспечивая необходимые углеродистые и азотистые соединения. Фосфаты поддерживают буферную емкость.

Все виды Listeria обладают β-глюкозидазной активностью. В процессе гидролиза эскулина (замещенного гликозида) на глюкозу и эскулетин, последний взаимодействует с ионами трехвалентного железа из цитрата аммония-железа (FD141), образуя комплекс 6,7-дигидрокумарин, который окрашивает среду в темно-коричневый или черный цвет.

Для подавления сопутствующей микрофлоры используются следующие компоненты:

Хлорид лития и высокая концентрация NaCl: ингибируют рост энтерококков, способных к гидролизу эскулина.
Налидиксовая кислота и акрифлавина гидрохлорид (FD125I): подавляют рост большинства грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

Суспендировать 54,92 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
При необходимости нагреть до полного растворения.
Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
Охладить до 45–50 °C.
Асептически добавить добавки:
- Для первичного обогащения (на 1000 мл): 1 флакон FD125I и 2 флакона FD141.
- Для вторичного обогащения (на 500 мл): 1 флакон FD125I и 1 флакон FD141.
Тщательно перемешать и разлить по пробиркам или колбам.

Процедура анализа

Первичное обогащение:
- Подготовить начальную суспензию: 25 г (или 25 мл) образца добавить к 225 мл среды (M1327 + 1 флакон FD125I + 2 флакона FD141).
- Инкубировать при температуре 30 ± 1 °C в течение 24–26 часов.
- При необходимости преобогащенный образец можно хранить при +5 °C не более 72 часов перед переносом во вторичную среду.
- Положительным признаком является появление черного окрашивания.
Вторичное обогащение:
- Перенести 0,1 мл культуры из первичного обогащения в 10 мл бульона Фрейзера (вторичное обогащение).
- Инкубировать при температуре 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 часов.
- Для выделения видов Listeria, отличных от L. monocytogenes, рекомендуется дополнительная инкубация в течение 24 часов.
Посев на селективные среды:
- После обогащения культуру высевают на оксфордский агар (M1145), среду PALCAM (M1064) или агар Ottaviani-Agosti (M1540I).
- Инкубировать при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 часов (дополнительные 24 часа для других видов листерий).

Технические характеристики

Состав (ISO 11290)

Состав на 1 литр среды:

Компонент	г/л
Ферментативный гидролизат животных тканей	5,000
Ферментативный гидролизат казеина (Триптон)	5,000
Дрожжевой экстракт	5,000
Мясной экстракт	5,000
Натрия хлорид	20,000
Натрия гидрофосфат дигидрат	12,000
Калия дигидрофосфат	1,350
Эскулин	1,000
Лития хлорид	3,000
Конечное значение pH (при 25 °C)	7,2 ± 0,2

Добавки (вносятся после автоклавирования)

Компонент	Half Fraser (г/л)	Half Fraser (флаконы/л)	Fraser (г/л)	Fraser (флаконы/л)
FD125I	—	1 флакон	—	2 флакона
Акрифлавина гидрохлорид	0,0125	0,025	0,0125	0,025
Налидиксовая кислота, натриевая соль	0,01	0,02	0,01	0,02
FD141	—	2 флакона	—	2 флакона
Цитрат аммония-железа	0,5	0,50	0,5	0,50

Общие параметры

Тип питательной среды: Элективный
Сертификат: ФСЗ 2009/03706
Внешний вид: гранулированный однородный сыпучий желтый порошок
Цвет готовой среды: желтая, прозрачная (после внесения добавок может проявляться флуоресценция и легкий преципитат)
pH (водный раствор 5,49% при 25 °C): 7,00–7,40
Материал упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Первичное обогащение (Half Fraser)

Инкубация при 30 ± 1 °C в течение 25 ± 1 ч. Последующий посев на M1540I при 37 ± 1 °C в течение 48 ± 4 ч.

Продуктивность

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Гидролиз эскулина	Восстановление на M1540I	Цвет колоний на M1540I
Listeria monocytogenes 1/2a ATCC 35152	50–100	хороший-обильный	положительная реакция, почернение среды	>10 колоний	сине-зеленые с опалесцирующим ореолом
Escherichia coli ATCC 25922	$\ge 10^4$	—	—	—	—
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$	—	—	—	—
Listeria monocytogenes 1/2a ATCC 35152	50–100	хороший-обильный	положительная реакция, почернение среды	>10 колоний	сине-зеленые с опалесцирующим ореолом
Escherichia coli ATCC 8739	$\ge 10^4$	—	—	—	—
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$	—	—	—	—
Listeria monocytogenes 4b ATCC 13932	50–100	хороший-обильный	положительная реакция, почернение среды	>10 колоний	сине-зеленые с опалесцирующим ореолом
Escherichia coli ATCC 25922	$\ge 10^4$	—	—	—	—
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$	—	—	—	—
Listeria monocytogenes 4b ATCC 13932	50–100	хороший-обильный	положительная реакция, почернение среды	>10 колоний	сине-зеленые с опалесцирующим ореолом
Escherichia coli ATCC 8739	$\ge 10^4$	—	—	—	—
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$	—	—	—	—

Селективность (восстановление на M290 при 37 ± 1 °C в течение 48 ± 4 ч)

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Восстановление на M290
Escherichia coli ATCC 25922	$\ge 10^4$	ингибирован	0
Escherichia coli ATCC 8739	$\ge 10^4$	ингибирован	0
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$	отсутствует-скудный	<100 колоний
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$	отсутствует-скудный	<100 колоний

Вторичное обогащение (Fraser)

Инкубация при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч. Последующий посев на M1540I при 37 ± 1 °C в течение 48 ± 4 ч.