Основа бульона Фрейзера HiMedia GM1327-500G (уп/500 гр)

Основа питательной среды «Основа бульона Фрейзера HiMedia GM1327-500G (уп/500 гр)» производства HiMedia — гранулированная элективная среда для микробиологического анализа. Применяется для первичного и вторичного обогащения, выделения и подсчёта Listeria monocytogenes в пищевых продуктах и кормах для животных; готовую среду хранят при +2…+8 °C.

Назначение

Основа бульона Фрейзера рекомендована для первичного и вторичного обогащения при выделении и подсчёте Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и кормов для животных. Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 11290-1:2017, ISO 11290-2:2017 и ISO 11133:2014 (E) /Amd.: 2020.

Среда предназначена для лабораторного анализа пищевых образцов. Формула основана на составе Фрейзера и Спербера и обеспечивает условия для роста видов Listeria. После этапов обогащения культуры пересевают на селективные среды для выделения и подсчёта колоний.

Состав

Спецификация ISO 11290 — половинный бульон Фрейзера и бульон Фрейзера

Бульон Фрейзера: половинный бульон Фрейзера и бульон Фрейзера

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей эффективности.

• # Эквивалент ферментативного гидролизата тканей животного происхождения.
• $ Эквивалент ферментативного гидролизата казеина.
• ## Эквивалент мясного экстракта.

Добавки после автоклавирования

Принцип действия и интерпретация

Пептон, триптон, дрожжевой экстракт и экстракт HM обеспечивают среду углеродистыми и азотистыми питательными веществами. Фосфаты поддерживают буферную ёмкость среды.

Все виды Listeria обладают β-глюкозидазной активностью, которая проявляется почернением среды. Виды Listeria гидролизуют эскулин — замещённый гликозид — до глюкозы и эскулетина. Эскулетин взаимодействует с ионами железа(III) аммонийно-железного цитрата FD141 с образованием 6,7-дигидроксикумарина и чёрно-коричневого комплекса. Аммонийно-железный цитрат также усиливает рост L. monocytogenes.

Высокая устойчивость Listeria к хлориду натрия используется для подавления роста энтерококков. Хлорид лития также подавляет энтерококки, способные гидролизовать эскулин. Рост сопутствующих бактерий в значительной степени ингибируется налидиксовой кислотой и гидрохлоридом акрифлавина FD125I.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 54,92 г сухой обезвоженной среды — эквивалентное количество на 1 л — в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, ориентировочно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Для первичного обогащения асептически внесите восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки Фрейзера FD125I и 2 флаконов добавки Фрейзера FD141 в 1000 мл среды.
6. Для вторичного обогащения внесите по 1 флакону FD125I и FD141 в 500 мл среды.
7. Тщательно перемешайте и разлейте среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.

Пробоподготовка и проведение анализа

Начальная суспензия

Бульон используют как разбавляющую жидкость для приготовления начальной суспензии:

• 25 г образца или 25 мл образца добавляют к 225 мл среды M1327 с 1 флаконом FD125I и 2 флаконами FD141.

Первичное обогащение

Приготовленную в половинном бульоне Фрейзера суспензию инкубируют при 30 ± 1 °C в течение 24–26 ч.

После инкубации предварительно обогащённый образец допускается хранить при 5 °C не более 72 ч до переноса в бульон Фрейзера для вторичного обогащения. Во время инкубации может развиваться чёрное окрашивание.

Вторичное обогащение

1. Перенесите 0,1 мл культуры из среды первичного обогащения в 10 мл бульона Фрейзера для вторичного обогащения.
2. Инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.
3. Для видов Listeria, отличных от L. monocytogenes, рекомендуется дополнительная инкубация в течение 24 ч для восстановления большего количества видов.

После первичного и вторичного обогащения выполните пересев на основу агара HiCrome™ для Listeria по Оттавиани—Агости M1540I, основу среды Оксфорд для Listeria M1145 или основу агара для идентификации Listeria PALCAM M1064I. Инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч. Для восстановления большего количества видов Listeria spp., отличных от L. monocytogenes, рекомендуется дополнительная инкубация при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: GM1327-500G
• Масса: 500 г
• Тип питательной среды: элективная
• Назначение изделия: основа
• Форма среды: гранулированная
• Физическая форма: гранулы
• Происхождение: животного происхождения
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706
• Регистрация: зарегистрировано в Росздравнадзоре Российской Федерации

Контроль качества

Внешний вид: гранулированная среда кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды:

• базовая среда: прозрачный раствор жёлтого цвета с небольшим количеством осадка;
• после добавления FD125I и FD141: прозрачный раствор флуоресцентного жёлтого цвета с небольшим количеством осадка в пробирках.

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 5,49 % масс./об. при 25 °C.

pH: 7,00–7,40.

Конечное значение pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Половинный бульон Фрейзера — первичное обогащение: продуктивность

Культуральные характеристики определяют после добавления FD125I и FD141 и инкубации при 30 ± 1 °C в течение 25 ± 1 ч. Последующий пересев выполняют на M1540I с инкубацией при 37 ± 1 °C в течение 48 ± 4 ч.