HiMedia GM130-500G Агар Рогозы SL

Гранулированная питательная среда HiMedia GM130-500G Агар Рогозы SL предназначена для селективного культивирования лактобацилл из ротовой полости и фекалий. Среда применяется для выделения, количественного определения и идентификации лактобацилл в клинических образцах и пищевых продуктах; кислый pH и высокая концентрация ацетата натрия подавляют сопутствующую микрофлору, а приготовленную среду запрещено автоклавировать.

Назначение

Агар Рогозы SL, также известный как агар RMW, представляет собой модификацию среды, разработанной Rogosa, Mitchell и Wiseman. Среда используется для:

• селективного выделения лактобацилл;
• количественного определения лактобацилл;
• идентификации лактобацилл;
• анализа клинических образцов и пищевых продуктов.

Тип образцов: клинические образцы — слюна, фекалии и другие аналогичные материалы.

Среда содержит высокую концентрацию ацетата натрия и имеет кислый pH, благодаря чему подавляется рост сопутствующей бактериальной флоры, плесневых грибов, стрептококков и многих других микроорганизмов. Содержание солей делает среду непригодной для выделения молочнокислых лактобацилл, включая L. lactis, L. bulgaricus и L. helveticus.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности среды.

Принцип действия

Триптоза и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми соединениями, серой, микроэлементами и витаминами группы B, необходимыми для роста лактобацилл.

Декстроза, арабиноза и сахароза являются сбраживаемыми углеводами. Полисорбат 80 служит источником жирных кислот. Цитрат аммония и ацетат натрия подавляют рост плесневых грибов, стрептококков и многих других микроорганизмов. Дигидрофосфат калия обеспечивает буферную способность среды. Сульфат магния, сульфат марганца и сульфат железа являются источниками неорганических ионов.

Селективность для лактобацилл обеспечивается низким pH среды и добавлением уксусной кислоты, которые подавляют другую бактериальную флору. Высокая концентрация ацетата и кислый pH также подавляют многие штаммы других молочнокислых бактерий.

Методика приготовления

1. Приготовьте суспензию из 74,72 г сухой гранулированной среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения и полностью растворите среду.
3. Добавьте 1,32 мл ледяной уксусной кислоты.
4. Тщательно перемешайте.
5. Разлейте среду в культуральные пробирки или колбы.
6. Нагрейте до 90–100 °C и выдерживайте 2–3 мин.
7. Охладите до 45–50 °C для непосредственного посева.

Не автоклавировать.

Инкубация и анализ

Рекомендуемый режим инкубации посевов:

• температура: 30 °C;
• продолжительность: 5 суток;
• атмосфера: 95 % водорода и 5 % диоксида углерода (CO₂).

Альтернативный режим:

• температура: 37 °C;
• продолжительность: 3 суток;
• атмосфера: 95 % водорода и 5 % диоксида углерода (CO₂).

Если инкубация в указанной атмосфере невозможна, инокулированные чашки следует покрыть вторым слоем агара перед инкубацией.

Перед дальнейшей идентификацией все колонии необходимо проверить окрашиванием по Граму и каталазным тестом.

Ограничения применения

1. Рекомендуется инкубировать чашки при 30 °C в течение 5 суток или при 37 °C в течение 3 суток в атмосфере 95 % водорода и 5 % диоксида углерода (CO₂). Если это невозможно, инокулированные чашки следует покрыть вторым слоем агара перед инкубацией.
2. Высокая концентрация ацетата и кислый pH подавляют многие штаммы других молочнокислых бактерий.
3. Перед дальнейшей идентификацией все колонии необходимо проверять окрашиванием по Граму и каталазным тестом.
4. Содержание солей делает среду непригодной для выделения молочнокислых лактобацилл, например L. lactis, L. bulgaricus и L. helveticus.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в присутствии 5 % диоксида углерода (CO₂) и 95 % водорода (H₂) после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Внешний вид

Однородная гранулированная среда кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакцию определяют для водного раствора концентрацией 7,5 % масс./объём с добавлением 0,132 % об./об. уксусной кислоты при 25 °C.

pH: 5,4 ± 0,2.

Диапазон pH

5,20–5,60.

Обращение с образцами

Для клинических образцов следует применять соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным лабораторным руководствам и процедурам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера необходимо ознакомиться с маркировкой.
• При работе следует использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами необходимо соблюдать надлежащие правила микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами следует соблюдать стандартные меры предосторожности.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: