HiMedia GM1286I-500G Основа модифицированного соево-казеинового желчного бульона

Основа модифицированного соево-казеинового желчного бульона HiMedia GM1286I-500G — селективная обогащающая среда для обнаружения Escherichia coli O157:H7 в пищевых продуктах и кормах для животных. Состав и критерии эффективности среды соответствуют стандартам ISO 16654:2001 (Amd 2:2023) и ISO 11133:2014 (E).

Принцип измерения и интерпретация

Среда предназначена для обогащения и изоляции энтерогеморрагических штаммов Escherichia coli O157:H7, которые вызывают тяжелые пищевые токсикоинфекции. Формулировка среды рекомендована FDA и принята комитетом ISO (спецификация ISO/DIS 16654:1999).

Действие компонентов:

• Казеиновый гидролизат (Casitose) и соевый пептон: источники углерода, азота, длинноцепочечных аминокислот и других необходимых питательных веществ.
• D-глюкоза: ферментируемый углевод и источник энергии.
• Смесь желчных солей: подавляет рост грамположительных бактерий.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Фосфатный буфер: стабилизирует pH среды.
• Новобиоцин (добавляется в виде селективной добавки): обеспечивает селективность среды.

При подозрении на низкое содержание E. coli O157:H7 образец обогащают в данном бульоне с последующим посевом на селективные среды, такие как сорбито-макконковская агар (M298I) или геморрагический коли-агар (HC) (M1158).

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендируйте 16,5 г основы в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости прогрейте для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое одного флакона селективной добавки № 20 (FD290).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по емкостям.

Процедура анализа

1. Смешайте 25 г исследуемого пищевого образца с 224 мл модифицированного соево-казеинового желчного бульона.
2. Инкубируйте при 37 °C в течение 18–24 часов при перемешивании (около 100 об/мин).
3. Приготовьте разведения обогащенной культуры с использованием фосфатного буфера.
4. Высейте по 0,1 мл каждого разведения на чашки с HC-агаром.
5. Инкубируйте при 43 °C в течение 24 часов.

Альтернативный метод (ISO 16654:2001 & Amd 2:2023)

• Обогащение гомогенизированной пробы в бульоне GM12861 с инкубацией при 41,5 $\pm$1 °C в течение 6 часов, затем дополнительно от 12 до 18 часов.
• Изоляция на сорбито-макконковском агаре (M2981). Инкубация при 37 $\pm$1 °C в течение 21 $\pm$3 часов. Подтверждение колоний проводится путем биохимической характеристики.

Технические характеристики

Состав (согласно ISO 16654:2001, Amd 2:2023 ISO 11133:2014(E))

Состав (гранулированная основа GM12861)

Общие параметры

• Вес: 500 г

Культуральные характеристики

Характеристики оценивались после инкубации при 41,5 $\pm$1 °C в течение 6 часов (продуктивность) и 21 $\pm$3 часов (селективность) для GM12861, а также при 37 $\pm$1 °C в течение 21 $\pm$3 часов для M2981 с добавлением селективной добавки № 20 (FD290).

Тестирование на GM12861

Тестирование на M298I

* — соответствующие номера WDCM.

Область применения

Применяется для анализа пищевых продуктов и кормов для животных. Требуется проведение дальнейшего субкультивирования для окончательного подтверждения результатов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения основы: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.
• Хранить в сухом, вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.