Гранулированная основа питательной среды HiMedia GM1286I-500G Основа модифицированного соево-казеинового желчного бульона предназначена для обогащения образцов. Основа применяется для выявления Escherichia coli O157:H7 в пищевых продуктах и кормах для животных; для подтверждения результата требуется дальнейший пересев.

Назначение

Modified Soyabean Bile Broth Base — обогащающая питательная среда для выявления Escherichia coli O157:H7 в пищевых продуктах и кормах для животных. Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 16654:2001, поправки 2:2023, и ISO 11133:2014(E).

Тип продукта: гранулированная основа питательной среды
Физическая форма: гранулы
Назначение изделия: основа
Тип образца: пищевые продукты
Масса: 500 г

Состав

Состав по ISO 16654:2001, поправке 2:2023 и ISO 11133:2014(E)

Состав гранулированной основы Modified Soyabean Bile Broth Base GM12861

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Триптон эквивалентен ферментативному перевару казеина.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 16,5 г основы в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки № 20 (FD290).
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в необходимом объёме.

Принцип действия и интерпретация

Escherichia coli обычно обитает в кишечнике человека и теплокровных животных. У человека бактерия вызывает различные кишечные и внекишечные инфекции. По вирулентным свойствам штаммы Escherichia coli подразделяют на энтеротоксигенные (ETEC), энтеропатогенные (EPEC), энтероинвазивные (EIEC), веротоксигенные (VTEC) и энтерогеморрагические (EHEC).

Escherichia coli O157:H7 относится к энтерогеморрагическим штаммам и участвует в развитии пищевых инфекций. Modified Soyabean Bile Broth Base предназначена для обогащения и выделения Escherichia coli O157:H7. Рецептура среды разработана в соответствии с рекомендациями FDA для обогащения и выделения E. coli O157:H7; впоследствии среда была принята комитетом ISO как обогащающая среда для выявления и выделения E. coli O157:H7 согласно спецификации ISO/DIS 16654:1999.

Казитоза и соевый пептон обеспечивают среду углеродистыми и азотистыми соединениями, аминокислотами с длинной углеродной цепью и другими необходимыми питательными веществами для роста. D-глюкоза является ферментируемым углеводом и источником энергии. Смесь желчных солей подавляет рост грамположительных бактерий. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Фосфат эффективно буферирует среду. Новобиоцин придаёт среде селективность.

При подозрении на низкое содержание E. coli O157:H7 пищевой образец обогащают в Modified Soyabean Bile Broth, после чего выполняют высев на селективную среду, например агар МакКонки с сорбитолом (M298I) или агар для энтерогеморрагических кишечных палочек (HC Agar, M1158), для выделения и идентификации микроорганизма.

Методика обогащения и высева

1. Гомогенизируйте 25 г исследуемого пищевого образца в 224 мл Modified Soyabean Bile Broth.
2. Инкубируйте суспензию при 37 °C в течение 18–24 ч при перемешивании со скоростью около 100 об/мин.
3. Приготовьте разведения обогащённой культуры с использованием фосфатного буфера.
4. Нанесите по 0,1 мл каждого разведения на чашки с агаром HC.
5. Инкубируйте чашки при 43 °C в течение 24 ч.

Сбор и обработка образцов

Процедура по ISO 16654:2001 и поправке 2:2023

• Обогатите гомогенизированную аналитическую порцию в Modified Soyabean Bile Broth Base (M12861).
• Инкубируйте при 41,5 ± 1 °C в течение 6 ч, затем продолжайте инкубацию ещё 12–18 ч.
• Выполните выделение на основе агара МакКонки с сорбитолом (MacConkey Sorbitol Agar Base, M2981).
• Инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 21 ± 3 ч.
• Подтвердите принадлежность колоний биохимической характеристикой.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет среды: от кремового до жёлтого.
Форма: гранулированная.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет раствора: светло-янтарный.
Прозрачность: прозрачный раствор.

Реакция

Реакция 3,3 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики для GM12861 оценивают после инкубации при 41,5 ± 1 °C в течение 6 ч при проверке продуктивности и в течение 21 ± 3 ч при проверке селективности. В испытании используют добавленную селективную добавку № 20 (FD290). Для M2981 инкубацию проводят при 37 ± 1 °C в течение 21 ± 3 ч.