Основа Оксфордской среды для листерий HiMedia GM1145-500G (500 г)

Основа Оксфордской среды для листерий HiMedia GM1145-500G (500 г) — селективная гранулированная питательная среда, предназначенная для выделения и дифференциации видов Listeria из патологического материала и пищевых продуктов. Соответствует стандартам ГОСТ Р 51921-2002 и ФСЗ 2009/03709.

Область применения и принцип метода

Среда используется для селективного выделения Listeria monocytogenes — основного патогена рода Listeria, вызывающего инфекции у людей и животных.

Механизм селекции и идентификации:

• Питание: Специальный пептон обеспечивает необходимый набор нутриентов.
• Ингибирование: Хлорид лития и специфические антибиотики подавляют рост большинства грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов. Кукурузный крахмал нейтрализует токсичные метаболиты.
• Дифференциация: L. monocytogenes гидролизует эскулин до эскулетина. Взаимодействие эскулетина с трехвалентными ионами железа приводит к образованию характерных зон почернения вокруг колоний.

Состав (на 1 литр)

• Специальный пептон — 23,00 г
• Хлорид лития — 15,00 г
• Хлорид натрия — 5,00 г
• Кукурузный крахмал — 1,00 г
• Эскулин — 1,00 г
• Железа аммонийный цитрат — 0,50 г
• Агар-агар — 10,00 г

Конечное значение рН при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Приготовление и стерилизация

1. Растворить 27,75 г порошка в 500 мл дистиллированной воды.
2. Прокипятить до полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при 1 атм (121 °C) в течение 15 минут.
4. Остудить среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавить содержимое одного флакона соответствующей добавки: Оксфордской добавки для листерий (FD71) или Моксалактамовой добавки для листерий (FD126).
6. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Меры предосторожности: Хлорид лития является ядовитым веществом. Избегать вдыхания паров и контакта с кожей. При попадании на кожу промыть большим количеством воды.

Рекомендации по посеву и инкубации

Для сильно загрязненных образцов рекомендуется предварительное разбавление или селективное холодное обогащение.

• Биологические и фекальные образцы: Гомогенизация в 0,1% пептонной воде (M028), инокуляция 0,1 мл на среду или в бульон для обогащения, инкубация при 30 °C в течение 7 дней с последующим пересевом на селективную среду.
• Пищевые и экологические образцы: Использование селективного обогащения. Для молока/молочных продуктов: 25 г/мл образца добавить к 225 мл бульона UVM (M890A), инкубировать 48 часов при 30 °C.
• Финальный этап: Посев штрихом на Оксфордскую среду, инкубация аэробно 48 часов при 37 °C. Типичные черные колонии пересевают на Триптон Соевый Агар с казеиновым переваром (GM290/M290) для дальнейшей биохимической идентификации.

Контроль качества

• Внешний вид: Гранулы от светло-желтого до темно-желтого цвета.
• Готовая среда: Прозрачный гель темно-янтарного цвета с легкой опалесценцией.
• Консистенция: Соответствует 1,0%-ному агаровому гелю.
• pH готовой среды: 6,80–7,20.

Хранение и транспортировка

• Порошок: Хранить в плотно закрытом контейнере при температуре не выше +30 °C.
• Готовая среда: Хранить при температуре +2…+8 °C.