Основа бульона (вторичного) обогащения для листерий HiMedia GM1083-500G (500 г)

Основа бульона (вторичного) обогащения для листерий HiMedia GM1083-500G (500 г) — гранулированная основа питательной среды для микробиологического анализа. Основа применяется для выделения, культивирования и обогащения Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и объектов внешней среды; после дальнейшей идентификации требуются биохимические и серологические тесты.

Назначение

Среда рекомендована для выделения, культивирования и обогащения Listeria monocytogenes из пищевых образцов и образцов окружающей среды.

Состав

Состав стандартизирован для обеспечения заданных рабочих характеристик среды.

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Приготовление среды

1. Взвесьте 57,85 г гранулированной основы и суспендируйте в 990 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения компонентов среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона обогатительной добавки Фрезера FD065 или одного флакона селективной добавки Фрезера FD125.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в требуемые ёмкости, включая пробирки.

Принцип действия и интерпретация

Основа бульона вторичного обогащения Фрезера представляет собой модификацию вторичного бульона UVM Министерства сельского хозяйства США — Службы инспекции безопасности пищевых продуктов (USDA-FSIS). Состав основан на рецептуре Fraser и Sperber и предназначен для создания условий, оптимальных для роста Listeria.

Протеозопептон, триптон, дрожжевой экстракт и пептон HM B обеспечивают высокую питательность среды, являясь источниками необходимых углеродистых и азотистых веществ. Фосфаты поддерживают буферную ёмкость среды.

Все виды Listeria обладают β-глюкозидазной активностью, которая проявляется почернением среды. Виды Listeria гидролизуют эскулин — замещённый глюкозид — с образованием глюкозы и эскулетина. Эскулетин взаимодействует с ионами железа, содержащимися в цитрате аммония железа, с образованием чёрно-коричневого комплекса 6,7-дигидроксикумарина.

Цитрат аммония железа также способствует росту L. monocytogenes. Высокая устойчивость Listeria к хлориду натрия используется для подавления роста энтерококков. Хлорид лития также подавляет энтерококки, которые способны гидролизовать эскулин. Рост сопутствующей микрофлоры в значительной степени подавляется добавлением налидиксовой кислоты и гидрохлорида акрифлавина, содержащихся в добавках FD065 или FD125.

Типы образцов

• Пищевые продукты.
• Образцы окружающей среды.

Отбор и обращение с образцами

При работе с пищевыми образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным методическим рекомендациям.

При отборе и обработке образцов окружающей среды применяйте соответствующие методы согласно действующим методическим рекомендациям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила микробиологической безопасности при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным методическим рекомендациям.
• Дополнительные требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Хлорид лития ядовит. Не допускайте контакта с хлоридом лития и вдыхания его паров. При попадании хлорида лития на кожу немедленно промойте поражённый участок большим количеством воды.

Ограничения применения

Для окончательной идентификации выделенных микроорганизмов необходимо дополнительно выполнить биохимические и серологические исследования.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет среды: от кремового до жёлтого. Физическая форма: гранулированная.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основная среда: жёлтый прозрачный раствор с небольшим количеством осадка.
• После добавления FD065 или FD125: в пробирках образуется флуоресцентно-жёлтый прозрачный раствор с небольшим количеством осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 5,78 % при 25 °C.

• Значение pH: 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч с добавлением обогатительной добавки Фрезера FD065 или селективной добавки Фрезера FD125.

* Соответствующие номера WDCM.

Рост культур

Условия оценки роста: посевная доза 10²–10³ КОЕ/мл.

• Обильный рост: более 70 % от засеянных образцов.
• Хороший рост: более 40 %, но менее 70 %.
• Плохой рост: более 20 %, но менее 40 %.
• Скудный, слабый рост: более 10 %, но менее 20 %.
• Скудный рост: более 10 %.
• Отсутствие роста: видимые колонии отсутствуют.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа.
• Масса: 500 г.
• Конечное значение pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.
• Регистрационное удостоверение: ФСЗ 2009/03706.
• Стандарт: ГОСТ Р 51921-2002.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой основы: 10–30 °C; в оригинальной инструкции также указано хранение при температуре ниже +30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер в сухом, вентилируемом месте, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Защищайте гранулированную основу от влаги: продукт гигроскопичен, а ненадлежащее хранение может привести к образованию комков.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики сохраняются при использовании в пределах указанного срока годности и соблюдении рекомендованных условий хранения.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать после автоклавирования и/или сжигания.

Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными процедурами обращения с инфекционными материалами.