Агар для идентификации листерий (основа) (ПАЛКАМ) HiMedia GM1064-500G (500 г)

Сухая питательная среда Агар для идентификации листерий (основа) (ПАЛКАМ) HiMedia GM1064-500G (500 г) производства HiMedia в гранулированной форме. Рекомендуется для селективного выделения и идентификации видов Listeria из клинических и неклинических образцов.

Принцип измерения и интерпретация

Среда PALCAM (Polymyxin-Acriflavin-Lithium chloride-Ceftazidime-Aesculin-Mannitol) разработана для изоляции L. monocytogenes из пищевых продуктов. Высокая селективность обеспечивается присутствием хлорида лития, цефтазидима, полимиксина B и гидрохлорида акрифлавина.

Дифференциальная диагностика основана на двух индикаторных системах:

1. Эскулин и цитрат железа: L. monocytogenes гидролизует эскулин с образованием эскулетина. Эскулетин взаимодействует с цитратом железа(III) аммония, образуя коричнево-черный комплекс, который проявляется в виде черного ореола вокруг колоний.
2. Маннитол и феноловый красный: L. monocytogenes не ферментирует маннитол. Контаминанты, такие как энтерококки и стафилококки, ферментируют маннитол, что вызывает изменение цвета среды с красного на желтый.

В микроаэрофильных условиях подавляется рост строгих аэробов, таких как виды Bacillus и Pseudomonas.

Дополнительные возможности:

• Добавление яичного желтка (2,5 % об./об.) способствует восстановлению поврежденных клеток.
• Использование среды с кровью поверх агара PALCAM позволяет дифференцировать и подсчитывать гемолитические виды Listeria.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворить 34,44 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить содержимое одного флакона селективной добавки PALCAM (FD061).
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Посев и инкубация

В зависимости от типа образца перед посевом на агар PALCAM рекомендуется использовать селективные бульоны для обогащения:

• Для молочных продуктов: Listeria Selective Enrichment Medium.
• Для мяса и птицы: Listeria Selective Enrichment Medium UVM (M890A) или вторичный бульон Фрейзера (M1083).

Инкубация проводится при температуре 35 °C в течение 24–48 часов в аэробных или микроаэрофильных условиях. Колонии Listeria имеют серо-зеленый цвет с черным осадком.

Область применения

• Клинические образцы: фекалии, биологические жидкости.
• Пищевые продукты: мясо, птица, молочные продукты.
• Пробы воды.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: гранулированная среда от светло-желтого до розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,3 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 7,0 $\pm$ 0,2 для 6,9 % (масс./об.) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются в микроаэрофильных условиях с добавлением селективной добавки PALCAM (FD061) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения и предостережения

1. Различные микроорганизмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативность на данной среде.
2. Среда не является окончательно дифференцирующей; для точного разграничения видов Listeria требуется дополнительное биохимическое тестирование.
3. Только для профессионального использования в лабораторных условиях (In Vitro).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать крышку во избежание образования комков.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.