HiMedia GM078-500G Агар Клиглера железный

Дифференциальная питательная среда HiMedia GM078-500G Агар Клиглера железный для идентификации грамотрицательных энтеробактерий на основе ферментации глюкозы, лактозы и продукции сероводорода. Применяется для анализа клинических, пищевых, молочных и проб воды; вес упаковки составляет 500 г.

Область применения

Среда рекомендуется для дифференциальной идентификации грамотрицательных энтерических бацилл из клинических и неклинических образцов. Используется для разделения лактозоположительных и лактозоотрицательных штаммов, а также для дифференциации Salmonella Typhi от других видов Salmonella, а также Salmonella Paratyphi A от Salmonella Scottmuelleri и Salmonella Enteritidis.

Принцип измерения и интерпретация

Агар Клиглера железный представляет собой комбинацию среды с ацетатом свинца и двухсахарного агара Рассела. В качестве индикатора pH используется феноловый красный.

Механизм дифференциации

• Ферментация глюкозы (декстрозы): приводит к образованию кислоты, что меняет цвет индикатора с красного на жёлтый. Из-за малого количества глюкозы производство кислоты ограничено, что вызывает реокисление индикатора на поверхности (скос остаётся красным).
• Ферментация лактозы: приводит к образованию большого количества кислоты, что препятствует реокислению, и вся среда (включая скос) становится жёлтой.
• Продукция сероводорода (H₂S): комбинация сульфата железа (II) и тиосульфата натрия позволяет обнаружить H₂S, что проявляется в виде чёрного окрашивания всего столбика или образования чёрного кольца у верхней части столбика.
• Лактозоотрицательные микроорганизмы (например, Salmonella и Shigella): изначально создают жёлтый скос за счёт ферментации глюкозы. После исчерпания глюкозы в аэробных условиях скоса реакция возвращается к щелочной (красный скос), однако в анаэробных условиях столбика среда остаётся кислой (жёлтый столбик).
• Отсутствие ферментации: если не ферментируются ни глюкоза, ни лактоза, среда сохраняет исходный цвет.
• Газообразование: определяется по наличию пузырьков газа, растрескиванию или смещению агара в столбике.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 57,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Тщательно перемешайте и разлейте по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. Охладите пробирки в наклонном положении для формирования скоса с глубоким столбиком (около 25 мм / 1 дюйм).

Примечание: Избегайте перегрева, чтобы предотвратить выпадение осадка в среде. Не используйте пробирки или бутыли с завинчивающимися крышками.

Посев и анализ

Для инокуляции следует использовать прямую проволочную петлю. Посевом являются чистые изоляты с таких сред, как агар МакКонки (M081), бисмузо-сульфитный агар (M027), дезоксихолат-цитратный агар (M065) или SS-агар (M108).

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Технические характеристики

• Внешний вид: светло-жёлтый или розовый гранулированный свободнотекучий порошок
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5% агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: красный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Реакция (5,75% водный раствор при 25 °C): pH 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: гранулированный
• Форма выпуска: гранулы
• Материал упаковки: ПНД (полиэтилен низкого давления)

Ограничения и требования

1. Результаты следует фиксировать через 18–24 часа для предотвращения ошибочных выводов.
2. Для инокуляции необходимо использовать только прямую проволочную петлю.
3. Для точности анализа следует использовать чистые изоляты.
4. Для полной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Утилизация

Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с установленными лабораторными правилами работы с инфекционными материалами.