Агар ксилозо-лизиновый дезоксихолатный HiMedia GM031-500G (500 г)

Питательная среда Агар ксилозо-лизиновый дезоксихолатный HiMedia GM031-500G (500 г) — гранулированный агар для микробиологического анализа. Применяется для выделения и количественного определения Salmonella Typhi и других видов Salmonella из клинических, пищевых, молочных и водных образцов; среда селективна для грамотрицательных микроорганизмов и дифференцирует бактерии по ферментации углеводов, декарбоксилированию лизина и образованию H₂S.

Назначение и область применения

Агар ксилозо-лизиновый дезоксихолатный (XLD Agar) предназначен для выделения и количественного определения Salmonella Typhi и других видов Salmonella из клинических и неклинических образцов.

Типы образцов:

• клинические образцы: фекалии, моча и другие;
• пищевые и молочные продукты;
• вода.

Среда рекомендована для идентификации энтеробактерий и микробиологического исследования пищевых продуктов, воды и молочных продуктов. Образцы, предположительно содержащие кишечные патогены вместе со смешанной микрофлорой, первоначально обогащают в модифицированной полутвёрдой основе среды RV (M1482).

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

XLD-агар является одновременно селективной и дифференциальной средой. В качестве селективного агента используется дезоксихолат натрия, поэтому среда ингибирует рост грамположительных микроорганизмов.

Дрожжевой экстракт обеспечивает микроорганизмы азотом и витаминами, необходимыми для роста. Ксилоза, лактоза и сахароза служат источниками ферментируемых углеводов. Ксилоза включена в состав прежде всего потому, что не ферментируется шигеллами, но практически всегда ферментируется энтеробактериями, что позволяет дифференцировать виды Shigella.

Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. L-лизин используется для дифференциации группы Salmonella от непатогенных микроорганизмов. Сальмонеллы быстро ферментируют ксилозу и исчерпывают её запас, после чего фермент лизиндекарбоксилаза декарбоксилирует лизин с образованием аминов и восстановлением щелочного значения pH, имитируя реакцию шигелл.

Для предотвращения этой реакции у лизин-положительных колиформ в состав добавлены лактоза и сахароза, образующие избыток кислоты. Разложение ксилозы, лактозы и сахарозы до кислот вызывает изменение цвета индикатора фенолового красного на жёлтый.

Бактерии, декарбоксилирующие лизин с образованием кадаверина, выявляются по красному окрашиванию вокруг колоний вследствие повышения pH. Реакции могут протекать одновременно или последовательно, поэтому при длительной инкубации индикатор pH может приобретать различные оттенки или изменять цвет с жёлтого на красный.

Для дополнительной дифференциации в состав включена система выявления H₂S, состоящая из тиосульфата натрия и цитрата аммония железа. Образующийся сероводород визуализируется в виде колоний с чёрными центрами. Непатогенные продуценты H₂S не декарбоксилируют лизин, поэтому образующаяся кислая реакция препятствует почернению колоний.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 56,68 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте при частом перемешивании до кипения среды.
3. Не автоклавируйте и не перегревайте среду.
4. Сразу перенесите среду на водяную баню с температурой 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Не рекомендуется готовить большие объёмы среды, требующие длительного нагревания, поскольку это может привести к образованию осадка. Незначительное выпадение осадка является свойством среды и не влияет на её рабочие характеристики.

Обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с пробами согласно установленным руководствам.

Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

Для водных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры безопасности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• При необходимости обращайтесь к паспортам безопасности для получения указаний по безопасной работе.

Ограничения применения

1. В среде может образовываться незначительный осадок; это свойство среды не влияет на её рабочие характеристики.
2. Среда является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.
3. Некоторые штаммы Proteus могут давать окрашивание от красного до жёлтого у большинства колоний с формированием чёрных центров, что приводит к ложноположительным реакциям.
4. Неэнтеробактерии, такие как Pseudomonas и Providencia, могут образовывать красные колонии.
5. S. Paratyphi A, S. Choleraesuis, S. Pullorum и S. Gallinarum могут формировать красные колонии без H₂S и тем самым имитировать виды Shigella.

Техническое отличие метода

В составе XLD-агара используется дезоксихолат натрия как селективный агент и сочетание ксилозы, лактозы, сахарозы, L-лизина и системы выявления H₂S для одновременного подавления грамположительной микрофлоры и дифференциации энтеробактерий; производитель указывает повышенные селективность и чувствительность по сравнению с агаром SS (M108), агаром ЭМБ (M022) и висмут-сульфитным агаром (M027).

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтая или розовая гранулированная среда.

Желирование

Плотное желе, сопоставимое с 1,5 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 5,67 % мас./об. при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 35–37 °C в течение указанного времени. Степень восстановления принимается за 100 % при росте бактерий на соево-казеиновом агаре.