Дезоксихолатный агар (гранулированная форма) HiMedia GM030-500G (500 г)

Питательная микробиологическая среда Дезоксихолатный агар (гранулированная форма) HiMedia GM030-500G (500 г) предназначена для дифференциального подсчёта колиформных бактерий. Среда применяется для выделения кишечных патогенов из молочных продуктов, ректальных мазков, фекалий и других патологических образцов, при этом из-за высокой селективности её рекомендуется использовать совместно с менее селективной средой.

Назначение и область применения

Дезоксихолатный агар предназначен для:

• прямого дифференциального подсчёта колиформных бактерий в молочных продуктах;
• выделения кишечных патогенов, относящихся к родам Salmonella и Shigella, из ректальных мазков, фекалий и других патологических образцов;
• исследования клинических образцов, пищевых продуктов и молочных проб;
• посева образцов после культивирования в селенитовом бульоне.

Среда особенно рекомендуется для выявления Shigella и Salmonella при исследовании ректальных мазков и фекалий. На среде указанные микроорганизмы образуют бесцветные колонии.

Для рутинного исследования образцов кала и мочи рекомендуется применять Дезоксихолатный агар совместно с другими средами, например агаром МакКонки M082 и висмут-сульфитным агаром M027.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 45,03 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте приготовляемую среду.
4. Избегайте чрезмерного или продолжительного нагревания при восстановлении среды.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация результатов

Дезоксихолатный агар приготовлен по рецептуре Лейфсона. Селективность среды позволяет использовать достаточно большие посевные дозы без риска перерастания Shigella и Salmonella другими представителями микрофлоры.

Пептон обеспечивает среду источниками углерода и азота, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и минеральными веществами.

Дезоксихолат натрия и цитрат натрия ингибируют или значительно подавляют рост колиформных и грамположительных бактерий. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды, а дикалийфосфат выполняет буферную функцию.

Лактоза используется для дифференциации энтеробактерий:

• бактерии, ферментирующие лактозу, образуют красные колонии;
• бактерии, не ферментирующие лактозу, образуют бесцветные колонии;
• колиформные бактерии при наличии образуют на среде розовые колонии.

Разложение лактозы вызывает подкисление среды вокруг соответствующих колоний. Индикатор pH нейтральный красный изменяет окраску на красную. Такие колонии обычно окружены мутной зоной осаждённой дезоксихолевой кислоты, образующейся вследствие подкисления среды. В кислой среде дезоксихолат натрия соединяется с нейтральным красным, в результате чего краситель выходит из раствора с последующим осаждением дезоксихолата.

Сочетание цитрата и железа оказывает выраженное гидролизующее воздействие на агар при нагревании, вследствие чего образуется мягкий и неэластичный агар. После автоклавирования агар становится мягким и практически непригодным для штрихового посева.

Поверхностные колонии бактерий, не ферментирующих лактозу, часто поглощают небольшое количество красителя из среды и приобретают розоватую окраску. Такие микроорганизмы могут быть ошибочно приняты за колиформные бактерии.

Типы образцов

• Клинические образцы: ректальные мазки, фекалии и другие патологические образцы.
• Пищевые и молочные образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно утверждённым руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Использовать для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно утверждённым руководствам.
• При необходимости обращайтесь к индивидуальным паспортам безопасности.

Ограничения применения

1. Среда обладает высокой селективностью, поэтому рекомендуется использовать её совместно с менее селективной средой, например агаром МакКонки.
2. Среда не рекомендуется для случаев, когда ожидается низкая степень выделения требуемого патогена.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтая или розовая гранулированная среда.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель красновато-оранжевого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция среды

Реакция 4,5%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: ниже 10–30 °C, в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики продукта обеспечиваются наилучшим образом при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Отличие по форме выпуска

HiMedia GM030-500G поставляется в гранулированной физической форме; приготовление выполняется суспендированием 45,03 г среды в 1000 мл дистиллированной воды с последующим нагреванием до кипения без автоклавирования.