Агар с эозином и метиленовым голубым (Левина) HiMedia GM022-500G (500 г)

HiMedia·Арт.: 0042204·Арт. произв.: GM022-500G

Агар с эозином и метиленовым голубым (Левина) HiMedia GM022-500G (500 г)

Name: Агар с эозином и метиленовым голубым (Левина) HiMedia GM022-500G (500 г)
Brand: HiMedia
SKU: 0042204
Price: 10250 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ10 250 руб.

Дифференциально-диагностическая среда Агар с эозином и метиленовым голубым (Левина) HiMedia GM022-500G (500 г) в гранулированной форме. Применяется для изоляции, подсчёта и дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae; соответствует ГОСТ Р 52814-2007.

Описание

Область применения

Среда используется для дифференциации Escherichia coli и Klebsiella aerogenes, а также для экспресс-идентификации Candida albicans. Рекомендуется для обнаружения и количественного учёта бактерий группы кишечной палочки (БГКП) в следующих образцах:

клинический материал: моча, фекалии, секреты из полости рта и влагалища, соскобы кожи и ногтей;
пищевые продукты и молочная продукция;
пробы воды.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Левина основана на использовании красителей эозина Y и метиленового голубого, которые делают среду слабоселективной, подавляя рост некоторых грамположительных бактерий. Красители выступают в роли дифференциальных индикаторов в зависимости от ферментации углеводов (лактозы), что позволяет разделить микроорганизмы на лактозоположительные и лактозоотрицательные.

Оптимальное соотношение эозина и метиленового голубого составляет примерно 6:1.

Лактозоположительные микроорганизмы (колиформы): при ферментации лактозы pH среды снижается, что приводит к поглощению колониями комплекса красителей эозина и метиленового голубого. В результате формируются пурпурно-чёрные колонии.
Лактозоотрицательные микроорганизмы: за счёт окислительного дезаминирования белков повышают pH окружающей среды, что делает комплекс красителей растворимым, и в итоге образуют бесцветные колонии.

Пептон служит источником углерода, азота, длинноцепочечных аминокислот и витаминов. Лактоза является основным ферментируемым углеводом (источником энергии). Фосфаты обеспечивают буферизацию среды.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

Суспендируйте 37,46 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут. Избегайте перегрева.
Охладите до 50 °C и встряхните среду для окисления метиленового голубого (восстановления синего цвета) и распределения осадка, который является важной частью среды.

Посев и инкубация

Образец можно наносить непосредственно на поверхность чашек с агаром методом штриха.
Инкубируйте посеянные чашки в защищённом от света месте.
Для идентификации Candida albicans в клинических образцах (фекалии, секреты, соскобы) требуется инкубация в течение 24–48 часов при 35–37 °C в атмосфере с содержанием CO₂ 10 %.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Компонент	г/л
Пептон	10,000
Гидрофосфат калия-калиевый	2,000
Лактоза	10,000
Эозин Y	0,400
Метиленовый голубой	0,065
Агар	15,000
Конечный pH (при 25 °C)	7,1 $\pm$ 0,2

Общие спецификации

Параметр	Значение
Происхождение компонентов	Животное
Тип продукта	Гранулированный
Физическая форма	Гранулы
Тип упаковки	ПНД (HDPE)

Контроль качества

Внешний вид: однородная гранулированная среда от светло-розового до пурпурного цвета.
Желирование: плотное, сопоставимо с 1,5% агаровым гелем.
Цвет и прозрачность готовой среды: красно-пурпурный опалесцирующий гель с зеленоватым оттенком и мелкодисперсным осадком в чашках Петри.
Реакция: pH 7,1 $\pm$ 0,2 (для 3,75% водного раствора при 25 °C).
Диапазон pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Выживаемость	Цвет колонии
Candida albicans ATCC 10231	50–100	обильный (в 10% CO₂)	$\ge$ 50%	бесцветные
Klebsiella aerogenes ATCC 13048	50–100	хороший	40–50%	розово-красные
Escherichia coli ATCC 25922	50–100	обильный	$\ge$ 50%	сине-чёрные с металлическим блеском
Enterococcus faecalis ATCC 29212	50–100	слабый/отсутствует	$\le$ 10%	бесцветные
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853	50–100	обильный	$\ge$ 50%	бесцветные
Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 6538	50–100	слабый/отсутствует	$\le$ 10%	бесцветные
Pseudomonas paraeruginosa ATCC 9027	50–100	обильный	$\ge$ 50%	бесцветные
Salmonella Typhimurium ATCC 14028	50–100	обильный	$\ge$ 50%	бесцветные
Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763	50–100	слабый/отсутствует	$\le$ 10%	кремовые
Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923	50–100	слабый/отсутствует	$\le$ 10%	бесцветные
Escherichia coli ATCC 8739	50–100	обильный	$\ge$ 50%	сине-чёрные с зелёным металлическим блеском

Ограничения и предостережения

Среда не является универсальной; параллельно с EMB-агаром следует использовать неселективную среду.
Для окончательной идентификации изолированных колоний необходимо проведение подтверждающих тестов.
Некоторые штаммы Salmonella и Shigella могут не расти в присутствии эозина и метиленового голубого.
Хранить готовую среду и сухой порошок в защищённом от света месте во избежание фотоокисления.

Условия эксплуатации и хранения

Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения комкования.
Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
Требования к помещению: сухое, вентилируемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников возгорания.
Утилизация: все загрязнённые материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.