Агар с эозином и метиленовым голубым (Левина) HiMedia GM022-500G (500 г)

Гранулированная питательная среда Агар с эозином и метиленовым голубым (Левина) HiMedia GM022-500G (500 г) для выделения, количественного определения и дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae, с конечным pH 7,1±0,2. Агар применяется для анализа клинических образцов, пищевых продуктов и воды, при этом некоторые штаммы Salmonella и Shigella не растут в присутствии эозина и метиленового голубого.

Назначение

Агар с эозином и метиленовым голубым (Левина) предназначен для:

• выделения представителей семейства Enterobacteriaceae;
• количественного определения микроорганизмов;
• дифференциации лактозоферментирующих и нефе рментирующих микроорганизмов;
• дифференциации Escherichia coli и Klebsiella aerogenes;
• быстрого выявления Candida albicans;
• обнаружения, количественного определения и дифференциации представителей группы колиформных бактерий.

Среда может использоваться для клинических образцов, пищевых продуктов, молочных продуктов и воды. Методика обнаружения, количественного определения и дифференциации представителей группы колиформных бактерий рекомендована Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA).

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Наименование: EMB Agar, Levine, гранулированная среда
• Артикул: GM022-500G
• Назначение изделия: агар
• Форма выпуска: гранулированная
• Масса: 500 г
• Тип упаковки: HDPE — полиэтилен высокой плотности
• Происхождение компонентов: животное
• Регистрационное удостоверение: ФСЗ 2009/03705
• Соответствие: ГОСТ Р 52814-2007

Состав

Формула на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих параметров среды.

Принцип действия и интерпретация

Среда EMB Agar, Levine, разработана Levine и используется для дифференциации Escherichia coli и Klebsiella aerogenes, а также для быстрой идентификации Candida albicans.

Эозин Y и метиленовый голубой придают среде слабую селективность и подавляют рост некоторых грамположительных бактерий. Красители работают как дифференциальные индикаторы при ферментации углеводов, что позволяет разделять лактозоферментирующие и нефе рментирующие микроорганизмы.

Соотношение эозина и метиленового голубого установлено приблизительно на уровне 6:1. При снижении pH колиформные бактерии поглощают комплекс красителей метиленового голубого и эозина, вследствие чего образуют пурпурно-чёрные колонии. Комплекс красителей абсорбируется колонией.

Неферментирующие микроорганизмы, вероятно, повышают pH окружающей среды за счёт окислительного дезаминирования белка. Это приводит к растворению комплекса метиленового голубого и эозина и образованию бесцветных колоний.

Функции компонентов среды:

• пептон служит источником углерода, азота, аминокислот с длинной цепью, витаминов и других необходимых питательных веществ;
• лактоза является источником энергии и ферментируемым углеводом;
• эозин Y и метиленовый голубой служат дифференциальными индикаторами;
• фосфат выполняет буферную функцию.

Выявление Candida albicans

Для быстрой идентификации Candida albicans в клинических образцах Weld предложил использовать среду EMB Agar, Levine, с добавлением гидрохлорида хлортетрациклина.

Положительную идентификацию Candida albicans можно выполнить после инкубации в течение 24–48 ч при 35–37 °C в атмосфере с содержанием 10 % диоксида углерода. В качестве образцов могут использоваться:

• фекалии;
• секреты ротовой полости;
• вагинальные выделения;
• соскобы с ногтей;
• соскобы с кожи.

Типичный внешний вид может быть вариабельным.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 37,46 г сухой гранулированной среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Не допускайте перегрева.
5. Охладите среду до 50 °C.
6. Встряхните среду для окисления метиленового голубого, то есть восстановления его синего цвета.
7. Одновременно суспендируйте осадок: наличие осадка является необходимой частью среды.

Методика посева и инкубации

1. Исследуемый образец можно непосредственно высевать штриховым методом на чашки с приготовленной средой.
2. Инокулированные чашки инкубируйте в защищённом от света месте.
3. Для получения изолированных колоний соблюдайте стандартные процедуры посева и инкубации.
4. Одновременно со средой EMB Agar инокулируйте неселективную среду.
5. Для идентификации выделенных колоний дополнительно проведите подтверждающие тесты.

Типы образцов

• Клинические образцы: моча, фекалии, секреты ротовой полости, вагинальные выделения, соскобы с ногтей и кожи.
• Пищевые продукты.
• Образцы воды.

Сбор и обращение с образцами

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.
• Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов в соответствии с руководствами.
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с руководствами и местными нормативами.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения

• Среду EMB Agar следует использовать совместно с неселективной средой.
• Для идентификации выделенных колоний необходимо дополнительно проводить подтверждающие тесты.
• Некоторые штаммы Salmonella и Shigella не растут в присутствии эозина и метиленового голубого.
• Типичный внешний вид Candida albicans может быть вариабельным.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-розовая или фиолетовая однородная гранулированная среда.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель красновато-фиолетового цвета с опалесценцией, зеленоватым оттенком и мелкодисперсным осадком.

Реакция

Реакция 3,75%-ного водного раствора по массе к объёму при 25 °C.

• pH: 7,1±0,2

Диапазон pH

• pH: 6,90–7,30

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.