HiMedia GM016A-500G Основа агара с бриллиантовым зеленым с 1.2% агара
Питательная среда — основа агара HiMedia GM016A-500G «Основа агара с бриллиантовым зеленым с 1,2 % агара» производства HiMedia, гранулированная, массой 500 г. HiMedia GM016A-500G применяют как обогатительную среду для выделения Salmonella из кала, мочи и других патологических материалов; из-за высокой селективности среду рекомендуется использовать совместно с менее ингибирующей средой.
Описание
Питательная среда — основа агара HiMedia GM016A-500G «Основа агара с бриллиантовым зеленым с 1,2 % агара» производства HiMedia, гранулированная, массой 500 г. HiMedia GM016A-500G применяют как обогатительную среду для выделения Salmonella из кала, мочи и других патологических материалов; из-за высокой селективности среду рекомендуется использовать совместно с менее ингибирующей средой.
Назначение
HiMedia GM016A-500G предназначена для обогащения и последующего выделения Salmonella из следующих типов образцов:
- клинические образцы — кал;
- пищевые и молочные продукты;
- образцы воды.
Состав
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Протеозопептон | 10,000 |
| Дрожжевой экстракт | 3,000 |
| Лактоза | 10,000 |
| Сахароза | 10,000 |
| Хлорид натрия | 5,000 |
| Феноловый красный | 0,080 |
| Бриллиантовый зелёный | 0,0125 |
| Агар | 12,000 |
| Конечный pH при 25 °C | 6,9 ± 0,2 |
Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.
Принцип действия и интерпретация
В состав основы входят бриллиантовый зелёный, пептон, дрожжевой экстракт, лактоза, сахароза, хлорид натрия, феноловый красный и агар.
Бриллиантовый зелёный подавляет рост большинства грамотрицательных и грамположительных бактерий. На среде преимущественно подавляется рост Salmonella Typhi, видов Shigella, Escherichia coli, видов Proteus, видов Pseudomonas и Staphylococcus aureus.
Протеозопептон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродсодержащими соединениями, аминокислотами с длинной углеродной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами.
Феноловый красный служит кислотно-основным индикатором. Бактерии, ферментирующие лактозу и/или сахарозу, вызывают появление жёлтой окраски. Бактерии, не ферментирующие лактозу, формируют белые или от бледно-розовых до красных колонии после инкубации в течение 18–24 ч.
Модифицированная бриллиантово-зелёная агаровая основа впервые была описана Kristensen и соавторами как первичная плотная среда для выделения видов Salmonella, а затем модифицирована Kauffmann. Клинические образцы можно непосредственно высевать на эту среду.
Из-за высокой селективности рекомендуется использовать среду совместно с менее ингибирующей средой для повышения вероятности выделения целевых микроорганизмов. Культуры, обогащённые в селенитной среде M025 или жидкой тетратионатной среде без йода и бриллиантового зелёного M032, часто высевают одновременно на основу агара с бриллиантовым зелёным и 1,2 % агара, бисмут-сульфитный агар M027, агар SS M108 и агар МакКонки M081.
Методика приготовления
- Суспендировать 25,0 г среды в 500 мл дистиллированной воды.
- Нагревать до кипения до полного растворения среды.
- Стерилизовать автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм², что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
- Охладить приготовленную среду до 45–50 °C.
- Для повышения селективности асептически добавить регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки S FD068.
- Тщательно перемешать.
- Разлить в стерильные чашки Петри или использовать другим предусмотренным способом.
Не допускать перегрева среды.
Сбор и обращение с образцами
При работе с клиническими образцами следует применять соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.
Для пищевых и молочных образцов необходимо использовать соответствующие методы отбора и обработки проб согласно применимым руководствам. Для образцов воды следует применять соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с руководствами и местными нормативными требованиями.
После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.
Ограничения применения
- Salmonella Typhi и виды Shigella могут не расти на этой среде.
- Виды Proteus, Pseudomonas и Citrobacter могут имитировать кишечные патогены, формируя небольшие красные колонии.
- Из-за высокой селективности основу рекомендуется использовать совместно с менее ингибирующей средой для повышения вероятности выделения микроорганизмов.
Технические характеристики
- Производитель: HiMedia
- Артикул: GM016A-500G
- Назначение изделия: основа агара
- Тип продукта: гранулированный
- Физическая форма: гранулы
- Масса: 500 г
- Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
- Происхождение: животное
- Концентрация агара в приготовленной среде: 1,2 %
- Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2
Контроль качества
Внешний вид
Однородная гранулированная среда от бежевого до светло-розового цвета.
Гелеобразование
Образуется плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.
Цвет и прозрачность приготовленной среды
В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зеленовато-коричневого цвета.
Реакция
Реакцию определяют для 5,0%-ного раствора среды в воде, приготовленного по массе к объёму, при 25 °C.
- pH: 6,9 ± 0,2
Культуральные характеристики
Культуральные характеристики определяли после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч. Степень восстановления, равная 100 %, принята по росту бактерий на соево-казеиновой агаровой среде.
| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление | Цвет колонии |
|---|---|---|---|---|
| Salmonella Typhimurium ATCC 14028 (00031*) | 50–100 | хороший–обильный | ≥50 % | белый с розоватым оттенком |
| Salmonella Abony NCTC 6017 (00029*) | 50–100 | хороший–обильный | ≥50 % | белый с розоватым оттенком |
| Salmonella Enteritidis ATCC 13076 (00030*) | 50–100 | обильный | ≥50 % | белый с розоватым оттенком |
| Salmonella Typhi ATCC 6539 | 50–100 | удовлетворительный–хороший | 30–40 % | красновато-розовый |
| Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) | 50–100 | отсутствует–слабый | 0–10 % | желтовато-зелёный |
| Escherichia coli ATCC 8739 (00012*) | 50–100 | отсутствует–слабый | 0–10 % | желтовато-зелёный |
| Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923 (00034*) | ≥10⁴ | ингибирован | 0 % | |
| Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 6538 (00032*) | ≥10⁴ | ингибирован | 0 % |
* Соответствующие номера WDCM.
Ожидаемые рабочие характеристики
Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке и в пределах срока годности при хранении в рекомендованных условиях.
Условия хранения и срок годности
- Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
- Условия хранения: плотно закрытый контейнер, сухое проветриваемое помещение, защита от экстремальных температур и источников воспламенения.
- Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
- После вскрытия необходимо хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон.
- Продукт гигроскопичен; негерметичное или ненадлежащее хранение может привести к образованию комков.
- После каждого использования контейнер следует плотно закрывать.
- Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
- Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.
Меры безопасности
Продукт предназначен для диагностики in vitro и профессионального применения.
При работе необходимо:
- прочитать этикетку перед открытием контейнера;
- использовать защитные перчатки;
- использовать защитную одежду;
- использовать средства защиты глаз;
- использовать средства защиты лица;
- соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами;
- соблюдать стандартные меры предосторожности при обращении с клиническими образцами;
- при необходимости обращаться к требованиям безопасности, указанным в индивидуальных паспортах безопасности.
Утилизация
Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.
При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.
Фактическое отличие от менее селективных сред
Основа агара с бриллиантовым зелёным содержит селективный компонент, подавляющий широкий спектр грамположительных и грамотрицательных бактерий, поэтому для повышения вероятности восстановления Salmonella её применяют в сочетании с менее ингибирующей средой.
Совместимые среды и добавки
- Селективная добавка S FD068.
- Селенитная среда M025.
- Жидкая тетратионатная среда без йода и бр
Характеристики
Производитель/Серия
| Производитель | HiMedia |
|---|
Назначение изделия
| Назначение изделия | Основа |
|---|
Габариты и вес
| Вес | 500г |
|---|
