LB ростовой верхний агар HiMedia G009-500G (500 г)

LB ростовой верхний агар HiMedia G009-500G (500 г) — сухая питательная среда с содержанием агара 7 г/л. Среда предназначена для культивирования и поддержания рекомбинантных штаммов Escherichia coli в генетических и молекулярно-биологических исследованиях; при 45–50 °C верхний агар остаётся расплавленным несколько дней.

Назначение

Среда рекомендована для культивирования и поддержания рекомбинантных штаммов Escherichia coli при проведении генетических и молекулярно-биологических исследований, а также для подготовки фаговой и плазмидной ДНК.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизована с учётом параметров эффективности среды.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 32 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 psi (≈0,10 МПа).
4. Тщательно перемешайте и разлейте в необходимом объёме.

Принцип действия и интерпретация

Среда LB, первоначально разработанная Бертани, широко применяется для выращивания E. coli и содержит питательные вещества в высокой концентрации. Её используют для поддержания и размножения плазмидной ДНК, а также для выращивания рекомбинантных штаммов, содержащих вектор экспрессии белка.

Компоненты обеспечивают факторы роста, необходимые штаммам E. coli:

• триптон служит источником необходимых пептидов и пептонов;
• дрожжевой экстракт содержит витамины, нуклеотиды, аминокислоты, углеводы и микроэлементы;
• хлорид натрия обеспечивает ионами натрия, участвующими в мембранном транспорте, и помогает поддерживать осмотическое равновесие среды.

Верхний агар используют для равномерного распределения бактериофагов и бактериальных клеток в тонком слое на поверхности чашки. Поскольку в нём меньше агара, чем в обычной среде для чашек, при хранении при 45–50 °C он остаётся расплавленным несколько дней.

Контроль качества

• Внешний вид порошка: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 0,7%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность: в чашках Петри образуется светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: ниже 30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.