Сухая питательная среда в капсулах Агар HiEncap™ Мюллера-Хинтона HiMedia EC173CCL-25NO (25 шт.) содержит 9,5 г среды в каждой капсуле. Предназначена для определения чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам и рекомендована для исследования чистых культур.

Назначение

Среда предназначена для определения чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам методом диффузии в агаре. Тип образца: клинические изоляты.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для достижения заданных рабочих характеристик.
$ Эквивалент настоя из говядины.

Эквивалент кислотного гидролизата казеина.

Приготовление среды

Одна капсула содержит 9,5 г сухой среды.

1. Суспендируйте 1 капсулу в 250 мл дистиллированной или очищенной воды; для приготовления 1000 мл используйте 4 капсулы.
2. Нагрейте до кипения, чтобы среда полностью растворилась.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин; указанное производителем давление — 15 psi (≈0,10 МПа).
4. Перед разливом тщательно перемешайте.

Рабочие характеристики партии проверены и стандартизированы в соответствии с действующим документом CLSI M6 «Протоколы оценки сухого агара Мюллера—Хинтона»; ранее организация использовала название NCCLS.

Принцип и особенности среды

Среда Мюллера—Хинтона первоначально была разработана как простая прозрачная агаровая среда для культивирования патогенных видов Neisseria. Впоследствии для их культивирования стали применять другие среды, однако агар Мюллера—Хинтона получил широкое распространение при определении устойчивости гонококков и других микроорганизмов к сульфаниламидам. В настоящее время его используют для определения чувствительности к антимикробным препаратам.

Среда рекомендована для диффузии антимикробных препаратов, нанесённых на бумажные диски, через агаровый гель. Для испытаний на чувствительность её выбрали по следующим причинам:

• обеспечивает хорошую воспроизводимость результатов между партиями;
• содержит низкие уровни ингибиторов сульфаниламидов, триметоприма и тетрациклина;
• поддерживает рост большинства неприхотливых бактериальных патогенов;
• накоплены значительный массив данных и опыт применения.

Kirby—Bauer и соавторы рекомендовали эту среду для испытаний чувствительности к антибиотикам с использованием одного диска с высокой концентрацией препарата. Комитет ВОЗ по стандартизации испытаний чувствительности принял агар Мюллера—Хинтона для определения чувствительности микроорганизмов благодаря его воспроизводимости. Для определения чувствительности Streptococcus pneumoniae и Haemophilus influenzae рекомендованы агар Мюллера—Хинтона с 5 % крови барана и агар Мюллера—Хинтона с гемоглобином.

Настой HM B и Acicase™ служат источниками азотсодержащих соединений, углерода, серы и других необходимых питательных веществ. Крахмал действует как защитный коллоид против токсичных веществ, присутствующих в среде; при гидролизе крахмала образуется декстроза, служащая источником энергии. Компоненты подобраны с низким содержанием тимина и тимидина; их влияние оценивают по значениям минимальной подавляющей концентрации (МПК) для Enterococcus faecalis при использовании сульфаметоксазола и триметоприма (SXT). Концентрации ионов кальция и магния скорректированы в соответствии с рекомендациями CLSI для получения корректных значений МПК аминогликозидов в отношении Pseudomonas aeruginosa.

Метод Kirby—Bauer основан на диффузии антимикробных веществ, нанесённых на бумажные диски, в агар. Используют диски с одной концентрацией антимикробного препарата; измеренные диаметры зон подавления роста сопоставляют со значениями минимальной подавляющей концентрации (МПК).

Методика определения чувствительности

1. Нанесите стандартизованную суспензию микроорганизма тампоном на всю поверхность среды.
2. Разместите на поверхности среды бумажные диски, пропитанные определёнными количествами антимикробных препаратов.
3. Инкубируйте посев.
4. Измерьте зоны подавления роста вокруг каждого диска.
5. Определите чувствительность, сравнив результаты с критериями CLSI.

На результат диско-диффузионного теста влияют глубина слоя агара, активность диска, концентрация инокулюма, pH среды и продукция бета-лактамазы исследуемыми микроорганизмами.

Контроль качества

• Внешний вид: желатиновая капсула с гранулированной средой кремового или жёлтого цвета.
• Содержание капсулы: 9,5 г; количество среды из одной капсулы достаточно для приготовления 250 мл.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем, содержащим 1,7 % агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета, образующийся в чашках Петри.
• Реакция 3,8 % водного раствора при 25 °C: pH 7,3 ± 0,1.
• Диапазон pH: 7,20–7,40.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.