Агар HiEncap™ Luria-основа, Miller's модификация HiMedia EC1726CCL-25NO (25 шт.)

Сухая питательная среда Агар HiEncap™ Luria-основа, Miller's модификация HiMedia EC1726CCL-25NO (25 шт.) производства HiMedia поставляется в желатиновых капсулах по 7,63 г, каждая рассчитана на приготовление 250 мл среды. Среда предназначена для культивирования и поддержания рекомбинантных штаммов Escherichia coli; глюкозу можно добавлять или не добавлять.

Назначение

Среду применяют для культивирования и поддержания рекомбинантных штаммов Escherichia coli, используемых в молекулярной микробиологии. Она подходит для выращивания чистых культур рекомбинантных штаммов с добавлением глюкозы или без неё.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Принцип действия

Основа Luria, модификация Miller, создана на основе исходной формулы Miller для роста и поддержания штаммов E. coli, применяемых в молекулярной микробиологии. Среда богата питательными веществами и предназначена для выращивания чистых культур рекомбинантных штаммов.

E. coli выращивают до поздней логарифмической фазы в среде LB. Некоторые плазмидные векторы могут реплицироваться с высокой численностью копий без селективной амплификации; другие векторы реплицируются менее свободно и требуют селективной амплификации. Для подавления синтеза клеточных компонентов хозяина и, как следствие, предотвращения репликации бактериальной хромосомы можно добавлять хлорамфеникол.

В модификации Miller содержание хлорида натрия составляет одну десятую от уровня в агаре LB по формуле Lennox и одну двадцатую от уровня по формуле Miller. Это позволяет подбирать оптимальную концентрацию соли для конкретного штамма. При необходимости среду можно асептически дополнить глюкозой.

Триптон обеспечивает среду пептидами и пептонами, дрожжевой экстракт — витаминами группы B. Хлорид натрия служит источником ионов натрия для мембранного транспорта и поддерживает осмотическое равновесие. Агар используется как отвердитель.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 1 капсулу в 250 мл дистиллированной или очищенной воды либо 4 капсулы в 1000 мл воды.
2. Нагревайте до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин; давление — около 0,10 МПа (15 psi).
4. Охладите до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте стерилизованный фильтрованием 20%-ный раствор глюкозы: 2,5 мл на 250 мл среды или 10 мл на 1000 мл.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Контроль качества

Культуральные характеристики

Результаты учитывают после инкубации в течение 18–24 ч при 35–37 °C. К 250 мл среды EC1726CCL добавляют 2,5 мл 20%-ного раствора декстрозы.

* Соответствующие номера WDCM.

Требования к образцам и меры предосторожности

Тип образца: рекомбинантные штаммы E. coli.

При работе с образцами рекомбинантных штаммов соблюдайте принятые правила обращения с лабораторными образцами. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку. Используйте защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица. При работе с образцами и культурами соблюдайте надлежащие микробиологические практики и стандартные меры предосторожности. Дополнительные указания по безопасности приведены в паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Из-за различий в питательных потребностях некоторые штаммы могут расти слабо.
• Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при соблюдении инструкции на этикетке, хранении при рекомендованной температуре и использовании до истечения срока годности.

Хранение и срок годности

• Температура хранения продукта: 10–30 °C, контейнер должен быть плотно закрыт.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Используйте продукт до срока годности, указанного на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде и плотно закрывайте контейнер, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните в сухом проветриваемом месте, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо утилизировать безопасным способом — автоклавированием и/или сжиганием. Инфекционные материалы и материалы, контактировавшие с образцом, обеззараживайте и утилизируйте в соответствии с принятыми лабораторными процедурами.

Технические характеристики