Агар HiEncap™ Мюллера-Хинтона No. 2 HiMedia EC1084D-10NO (10 шт.)

Сухая питательная среда Агар HiEncap™ Мюллера-Хинтона No. 2 HiMedia EC1084D-10NO (10 шт.) — капсулированный агар с низким содержанием тимина и тимидина. Среда предназначена для определения чувствительности быстрорастущих бактерий к антимикробным препаратам диско-диффузионным методом Бауэра—Кирби и не рекомендуется для требовательных микроорганизмов.

Назначение и область применения

Среду используют для определения чувствительности быстрорастущих аэробных и факультативно-анаэробных бактерий из клинических образцов к антимикробным препаратам. Методика предназначена для чистых культур; среда рекомендована для тестирования распространённых быстрорастущих бактерий с помощью дисков, содержащих антимикробные препараты.

Тип образца: клинические изоляты.

Агар Мюллера—Хинтона первоначально разработан как простая прозрачная среда для культивирования патогенных видов Neisseria. Позднее для культивирования этих микроорганизмов стали применять другие среды, а агар Мюллера—Хинтона широко использовали при определении устойчивости гонококков и других микроорганизмов к сульфаниламидам. В настоящее время среду применяют для определения чувствительности к антимикробным препаратам.

Метод дисковой диффузии на агаре используют в соответствии с рекомендациями NCCLS, ныне CLSI. Среду выбрали для тестирования чувствительности по следующим причинам:

• воспроизводимость результатов между партиями;
• низкое содержание веществ, ингибирующих сульфаниламиды, триметоприм и тетрациклины;
• поддержка роста большинства нетребовательных бактериальных патогенов;
• наличие обширных данных и практического опыта применения.

Кирби—Бауэр и соавторы рекомендовали среду для антибиотикочувствительных тестов с одним диском высокой концентрации. Комитет ВОЗ по стандартизации тестирования чувствительности принял агар Мюллера—Хинтона для определения чувствительности микроорганизмов, учитывая воспроизводимость результатов.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизована для достижения заданных параметров эффективности. Ацикасерм соответствует кислотному гидролизату казеина; сухие вещества настоя HM B эквивалентны настою сердца.

Принцип действия и метод определения чувствительности

Среда содержит низкие концентрации тимина и тимидина; концентрации ионов кальция и магния скорректированы в соответствии с рекомендациями CLSI. Тимин и тимидин могут ингибировать активность сульфаниламидов и триметоприма, а ионы кальция и магния влияют на активность аминогликозидных антибиотиков.

Сухие вещества настоя HM B и ацикасерм обеспечивают поступление азотсодержащих соединений, углерода, серы и других необходимых питательных веществ. Крахмал действует как защитный коллоид, связывающий токсичные вещества, присутствующие в среде. При гидролизе крахмала образуется декстроза, служащая источником энергии.

Компоненты отбирают с учётом низкого содержания тимина и тимидина; это оценивают по значениям минимальной ингибирующей концентрации (МИК) для Enterococcus faecalis при применении комбинации сульфаметоксазола и триметоприма (SXT). Концентрации ионов кальция и магния регулируют для получения рекомендованных CLSI значений МИК при тестировании аминогликозидов и Pseudomonas aeruginosa.

Метод Бауэра—Кирби основан на диффузии антимикробных веществ из пропитанных ими бумажных дисков в агаровый гель. Для теста применяют диски с одной концентрацией антимикробного препарата; диаметры зон подавления роста соотносят со значениями МИК. Стандартизованную суспензию микроорганизма равномерно наносят тампоном на всю поверхность среды. Затем на поверхность помещают бумажные диски, содержащие заданное количество антимикробного препарата, проводят инкубацию и измеряют зоны подавления роста вокруг дисков. Чувствительность определяют сравнением результатов со стандартами CLSI.

Приготовление среды

Каждую капсулу суспендируют в 500 мл дистиллированной или очищенной воды; для приготовления 1000 мл используют 2 капсулы. Нагревают до кипения, чтобы полностью растворить среду. Стерилизуют в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин; указанное производителем давление — 15 psi, что соответствует приблизительно 0,10 МПа. Тщательно перемешивают и разливают в необходимую посуду.

В указаниях производителя приведены два значения массы содержимого капсулы: 19 г на капсулу в разделе приготовления и 9,5 г на капсулу в разделе контроля качества, где также указано, что одной капсулы достаточно для приготовления 250 мл среды. Эти значения не совпадают.

Контроль качества

• Внешний вид: желатиновая капсула с гранулированной средой кремового или жёлтого цвета.
• Студнеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем из 1,7 % агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри.
• Количество: в разделе контроля качества указано 9,5 г среды в капсуле; этого количества достаточно для приготовления 250 мл среды.
• Реакция: для водного раствора с концентрацией 3,8 % масс./об. при 25 °C значение pH составляет 7,3 ± 0,1.
• Диапазон pH: 7,20–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

• Среда предназначена только для тестирования чувствительности чистых культур.
• Плотность инокулюма влияет на размер зоны подавления роста: избыток инокулюма может уменьшить зону, а недостаточное количество инокулюма — увеличить её.
• Требовательные микроорганизмы могут не расти на этой среде; может потребоваться добавление крови.
• Требовательные анаэробы могут не расти на этой среде.
• Результат зависит от активности антибиотиксодержащего диска, поэтому диски необходимо хранить надлежащим образом.
• При некоторых условиях результаты определения чувствительности in vitro могут не совпадать с результатами in vivo.

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при приготовлении по инструкции, использовании до истечения срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта