Агар HiEncap™ Мюллера-Хинтона No. 2 HiMedia EC1084CCL-25NO (25 шт.)

Сухая питательная среда Агар HiEncap™ Мюллера-Хинтона No. 2 HiMedia EC1084CCL-25NO (25 шт.) производства HiMedia выпускается в желатиновых капсулах с дозировкой 9,5 г. Среда предназначена для определения чувствительности быстрорастущих бактерий к антимикробным препаратам диско-диффузионным методом Бауэра—Кирби; она не рекомендована для требовательных микроорганизмов.

Назначение и область применения

Среду применяют для тестирования чувствительности клинических изолятов быстрорастущих аэробных и факультативно-анаэробных бактерий к антимикробным препаратам с использованием дисков по методу Бауэра—Кирби. Она предназначена для исследования чистых культур и не рекомендована для требовательных микроорганизмов и требовательных анаэробов.

Среда содержит низкие уровни тимина и тимидина; концентрации ионов кальция и магния скорректированы в соответствии с рекомендациями Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI). Комитет Всемирной организации здравоохранения по стандартизации тестирования чувствительности принял агар Мюллера—Хинтона для определения чувствительности микроорганизмов благодаря воспроизводимости результатов.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизована для обеспечения заданных рабочих характеристик. Ацикасерм эквивалентен кислотному гидролизату казеина; сухие вещества настоя HM B эквивалентны настою говяжьего сердца.

Приготовление среды

Каждая капсула содержит 9,5 г сухой среды, достаточных для приготовления 250 мл. Для приготовления среды выполните следующие действия:

1. Суспендируйте 1 капсулу в 250 мл дистиллированной или очищенной воды либо 4 капсулы в 1000 мл воды.
2. Нагрейте до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,10 МПа).
4. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри либо распределите другим предусмотренным способом.

Принцип действия и методика анализа

Цель теста на чувствительность — оценить in vitro вероятность успешного лечения инфекции пациента конкретным антимикробным препаратом. Среду Мюллера—Хинтона первоначально разработали как простую прозрачную агаризованную среду для культивирования патогенных видов Neisseria. Позднее для культивирования этих микроорганизмов стали использовать другие среды, однако агар Мюллера—Хинтона получил широкое применение при определении устойчивости гонококков и других организмов к сульфонамидам. В настоящее время среду используют для тестирования чувствительности к антимикробным препаратам.

Агар Мюллера—Хинтона рекомендован для диффузии антимикробных веществ, нанесённых на бумажные диски, через агаровый гель в соответствии с утверждёнными стандартами CLSI. Среда выбрана для этой методики по следующим причинам:

• обеспечивает хорошую воспроизводимость результатов при тестировании чувствительности между сериями;
• содержит низкие уровни ингибиторов сульфонамидов, триметоприма и тетрациклина;
• поддерживает рост большинства неприхотливых бактериальных патогенов;
• накоплены значительный объём данных и практический опыт применения среды.

Агар Мюллера—Хинтона No. 2 применяют для тестирования быстрорастущих аэробных и факультативно-анаэробных бактерий, выделенных из клинических образцов. Кирби и Бауэр рекомендовали эту среду для тестов чувствительности к антибиотикам с использованием одного диска с высокой концентрацией препарата.

Метод Бауэра—Кирби основан на диффузии антимикробных веществ из бумажных дисков в агар. Используют диски с одной концентрацией антимикробного препарата; диаметр зон подавления роста сопоставляют со значениями минимальной ингибирующей концентрации (МИК).

1. Нанесите стандартизованную суспензию исследуемого микроорганизма тампоном на всю поверхность среды.
2. Разместите на поверхности среды бумажные диски, содержащие заданное количество антимикробных препаратов.
3. Инкубируйте посев.
4. Измерьте зоны подавления роста вокруг дисков.
5. Определите чувствительность, сравнив результаты с критериями CLSI.

На результаты диско-диффузионного теста влияют глубина агара, активность дисков, концентрация инокулюма, pH среды и продукция тестируемыми организмами бета-лактамазы.

Особенности состава и ограничения метода

Сухие вещества настоя HM B и ацикасерм обеспечивают азотистые соединения, углерод, серу и другие необходимые питательные вещества. Крахмал действует как защитный коллоид, связывая токсичные вещества, присутствующие в среде; при гидролизе крахмала образуется декстроза, служащая источником энергии.

Компоненты подобраны с учётом низкого содержания тимина и тимидина; это определяли по значениям МИК для Enterococcus faecalis при использовании сульфаметоксазола и триметоприма (SXT). Концентрации ионов кальция и магния скорректированы до рекомендованных CLSI значений, чтобы обеспечивать корректные значения МИК для аминогликозидов и Pseudomonas aeruginosa.

Тимин и тимидин могут ингибировать активность сульфонамидов и триметоприма. Ионы кальция и магния могут влиять на активность аминогликозидных антибиотиков.

Ограничения применения:

• Среда предназначена только для тестирования чистых культур.
• Плотность инокулюма влияет на размер зоны подавления роста: слишком плотный инокулюм может уменьшить зоны, а слишком низкая плотность — увеличить их.
• Требовательные микроорганизмы могут не расти на этой среде; в отдельных случаях может потребоваться добавление крови.
• Требовательные анаэробы могут не расти на этой среде.
• Для сохранения активности дисков с антибиотиками необходимо соблюдать надлежащие условия их хранения.
• Результаты определения чувствительности in vitro в отдельных случаях могут не совпадать с результатами in vivo.

Тип образцов и обращение с ними

Тип образца: клинические изоляты.

При работе с клиническими образцами соблюдайте установленные правила их сбора и обращения. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве до утилизации.

Контроль качества

Внешний вид: желатиновая капсула с гранулированной средой кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование: прочный гель, сопоставимый с 1,7%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный гель светло-янтарного цвета или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри.

Количество: 9,5 г среды в капсуле, достаточно для приготовления 250 мл.

Реакция 3,8%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,3 ± 0,1.

Диапазон pH: 7,20–7,40.

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при соблюдении инструкции на этикетке, рекомендуемых условий хранения и срока годности.

Хранение и срок годности

Невскрытую упаковку храните при 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при 20–30 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикет