HiMedia MV689-100G Декарбоксилазный HiVeg бульон Мёллера с аргинином

Сухая питательная среда HiMedia MV689-100G Декарбоксилазный HiVeg бульон Мёллера с аргинином на растительной основе. Применяется для дифференциации грамотрицательных энтеробактерий на основании их способности декарбоксилировать аминокислоты; вес упаковки 100 г.

Принцип измерения

Среда используется для дифференциации грамотрицательных энтеробактерий по способности вырабатывать декарбоксилазы аминокислот. В составе используются HiVeg® экстракт и HiVeg® пептон, обеспечивающие азотистым питанием. Декстроз служит ферментируемым углеводом, а пиридоксаль выступает кофактором фермента декарбоксилазы.

Индикаторами pH являются бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный. При инокуляции бактерий, ферментирующих декстроз, pH среды снижается за счет образования кислоты, и цвет индикатора меняется с пурпурного на желтый. Образовавшаяся кислота стимулирует работу фермента декарбоксилазы. Декарбоксилирование аргинина (после его гидролиза до орнитина) приводит к образованию путресцина. Образование этих аминов повышает pH среды, возвращая цвет индикатора из желтого в пурпурный. Если микроорганизмы не вырабатывают соответствующий фермент, среда остается кислой и желтой.

Методика проведения анализа

1. Подготовьте среду: суспендируйте 20,52 г порошка MV689 в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте смесь при необходимости до полного растворения.
3. Разлейте среду по 5 мл в пробирки с винтовыми крышками.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 10 минут.
5. Внесите исследуемый изолят в стерильную пробу.
6. Обязательно защитите поверхность среды от воздуха слоем стерильного минерального масла. Контакт с воздухом может вызвать защелачивание поверхности, что сделает тест недостоверным.
7. Инкубируйте пробирки при температуре 35–37 °C до 4 суток.
8. Для контроля каждый изолят должен быть также инокулирован в пробирку с базовой средой, не содержащей аминокислоты.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Конечный pH (при 25 °C): 6,0 ± 0,2
• Внешний вид порошка: зеленовато-желтый гомогенный сыпучий порошок
• Цвет и прозрачность раствора: пурпурный прозрачный раствор без осадка
• Стерилизация: 121 °C / 10 минут
• Хранение (сухая среда): при температуре ниже 30 °C
• Хранение (готовая среда): +2…+8 °C
• Происхождение: без компонентов животного происхождения (Veg)
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Результаты наблюдаются после инокуляции пробирок, покрытия стерильным минеральным маслом и инкубации при 35–37 °C до 4 суток.

Ключ:

• • : положительная реакция, пурпурный цвет
• • : отрицательная реакция, желтый цвет или отсутствие изменения цвета
• ± : вариабельный результат
• (+) : замедленная положительная реакция

Область применения

Среда рекомендуется для дифференциации бактерий на основании их способности декарбоксилировать аминокислоты. В частности, определение продукции орнитин-декарбоксилазы является важным критерием для различения видов Klebsiella (неподвижны, не продуцируют орнитин-декарбоксилазу) и Enterobacter (подвижны, продуцируют орнитин-декарбоксилазу, за исключением Enterobacter agglomerans).

Данная серия сред HiVeg® разработана с заменой пептонов животного происхождения на растительные, что исключает риски заражения BSE/TSE.