HiMedia MV689-100G Декарбоксилазный HiVeg бульон Мёллера с аргинином

Порошковая питательная микробиологическая среда HiMedia MV689-100G Декарбоксилазный HiVeg бульон Мёллера с аргинином предназначена для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты. Среда поставляется в виде порошка, имеет конечный pH 6,0 ± 0,2 при 25 °C и хранится при температуре ниже 30 °C.

Назначение

HiMedia MV689-100G применяют для дифференциации грамотрицательных кишечных палочек по способности декарбоксилировать аминокислоты. Среда содержит гидрохлорид L-аргинина и предназначена для выявления активности аргининдигидролазы; результаты оценивают по изменению окраски индикаторов pH.

Состав

Состав среды на 1 л:

Корректировка формулы: состав скорректирован и стандартизирован для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Профиль продукта

Растительная основа

Код MV:

• MV393/MV687/MV688/MV689;
• пептон HiVeg®;
• экстракт HiVeg®.

Животная основа

Код M:

• M393/M687/M688/M689;
• пептический перевар тканей животного происхождения;
• мясной экстракт.

Тип продукта по данным производителя: HiVeg™.
Происхождение: без компонентов животного происхождения, растительная основа.

Растительные пептоны HiVeg® используются вместо пептонов животного происхождения; для растительной основы заявлено отсутствие рисков BSE/TSE.

Принцип действия и интерпретация

Декарбоксилазные бульоны Мёллера используют для дифференциации грамотрицательных кишечных палочек по способности декарбоксилировать аминокислоты. Декарбоксилазный бульон был введён Мёллером для выявления образования лизиндекарбоксилазы, орнитиндекарбоксилазы и аргининдигидролазы.

Среда содержит экстракт HiVeg® и пептон HiVeg®, обеспечивающие бактерии азотистыми питательными веществами. Декстроза является ферментируемым углеводом, а пиридоксаль — кофактором фермента декарбоксилазы. Бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный выполняют функцию индикаторов pH.

После посева бактерий, ферментирующих декстрозу, pH снижается вследствие образования кислоты, а окраска индикатора изменяется с пурпурной на жёлтую. Кислота стимулирует фермент декарбоксилазу. В результате декарбоксилирования лизина образуется кадаверин, а при декарбоксилировании орнитина — путресцин. Аргинин сначала гидролизуется до орнитина, который затем декарбоксилируется с образованием путресцина.

Образование аминов повышает pH среды и изменяет окраску индикатора с жёлтой на пурпурную. Если микроорганизм не продуцирует соответствующий фермент, среда остаётся кислой и жёлтой. Каждый исследуемый изолят также необходимо инокулировать в пробирку с базовой средой без добавления аминокислоты.

Засеянные пробирки необходимо защищать от воздуха слоем стерильного минерального масла. Воздействие воздуха может вызвать подщелачивание поверхности среды, что делает результат теста недействительным.

Приготовление и регидратация

Норма восстановления:

• MV393: 10,52 г/л;
• MV687/MV688/MV689: 20,52 г/л.

Количество приготовленной среды:

• упаковка 500 г, MV393: 47,52 л;
• упаковка 100 г, MV393: 9,50 л;
• упаковка 100 г, MV687/MV688/MV689: 4,87 л.

Порядок приготовления

1. Суспендируйте 10,52 г MV393 или 20,52 г MV687/MV688/MV689 в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Для MV393 добавьте 10 г L-лизина, L-аргинина, L-орнитина или другой L-аминокислоты.
3. При использовании DL-аминокислот применяйте концентрацию 2 %.
4. При необходимости нагрейте среду для полного растворения.
5. При добавлении L-орнитина повторно отрегулируйте pH.
6. Разлейте среду по 5 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
7. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C в течение 10 мин и давлении 15 фунтов, что соответствует приблизительно 0,103 МПа.
8. Для приготовления среды MV687, MV688 или MV689 суспендируйте 20,52 г соответствующей среды в 1000 мл дистиллированной воды и стерилизуйте указанным выше способом.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инокуляции пробирок, покрытия стерильным минеральным маслом и инкубации при 35–37 °C в течение не более 4 суток.

Испытанные культуры для MV689:

1. Контроль.
2. Citrobacter freundii.
3. Enterobacter aerogenes.
4. Escherichia coli.
5. Klebsiella pneumoniae.
6. Proteus vulgaris.
7. Pseudomonas aeruginosa.
8. Salmonella serotype Typhi.
9. Shigella flexneri.

Обозначения результатов

• + — положительная реакция, пурпурная окраска;
• − — отрицательная реакция, жёлтая окраска или отсутствие изменения цвета;
• ± — вариабельная реакция;
• (+ ) — замедленная положительная реакция.

Контроль качества

Внешний вид порошка

Цвет: зеленовато-жёлтый.
Состояние: однородный, сыпучий порошок без комков.

Цвет и прозрачность раствора

Раствор прозрачный, пурпурного цвета, без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора MV393 с концентрацией 1,05 % масс./об. или MV687/MV688/MV689 с концентрацией 2,05 % масс./об.: pH 6,0 ± 0,2 при 25 °C.

Технические характеристики