HiMedia M025-100G Селенит-цистиновый бульон (Twin Pack)

Питательная микробиологическая среда HiMedia M025-100G Селенит-цистиновый бульон (Twin Pack) производства HiMedia в порошковой форме с конечным pH 7,0 ± 0,2. Применяется для селективного обогащения и выявления видов Salmonella в клинических, пищевых и молочных образцах; готовую среду нельзя автоклавировать, стерилизацию проводят в кипящей водяной бане или потоком пара 10 мин.

Назначение и область применения

Селенит-цистиновый бульон используют как селективную среду обогащения для культивирования видов Salmonella.

Среда предназначена для:

• выявления Salmonella при невысокой численности микроорганизмов в фекалиях на неострых стадиях заболевания;
• эпидемиологических исследований, включая обнаружение небольшого количества микроорганизмов у бессимптомных пациентов и пациентов в периоде выздоровления;
• восстановления клеток Salmonella, повреждённых при переработке пищевых продуктов воздействием низких температур, недостаточного нагревания, высушивания, радиации, консервантов или санитарных средств;
• селективного обогащения пищевых образцов после предварительного обогащения;
• анализа клинических образцов — фекалий;
• анализа пищевых и молочных образцов.

При исследовании пищевых образцов может потребоваться последовательность из предварительного обогащения, селективного обогащения и селективного высева, поскольку Salmonella может присутствовать в продукте в небольшом количестве или в повреждённом состоянии.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована с учётом параметров эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Селективное ингибирующее действие селенита основано на подавлении сопутствующей микрофлоры при сохранении возможности размножения Salmonella. Селенит-цистиновый бульон представляет собой модификацию формулы Лейфсона с добавлением цистина.

Состав среды соответствует формуляции, рекомендованной AOAC для выявления Salmonella в пищевых продуктах, особенно в яичных продуктах; среда также рекомендована APHA и USP как методическая основа соответствующих микробиологических исследований.

Функции компонентов:

• триптон обеспечивает азотистые питательные вещества;
• лактоза служит сбраживаемым углеводом и участвует в поддержании pH среды при восстановлении селенита бактериальными клетками и образовании щёлочи;
• повышение pH снижает токсичность селенита и может привести к избыточному росту других бактерий;
• кислота, образующаяся при сбраживании лактозы, способствует поддержанию нейтрального pH;
• фосфат поддерживает стабильный pH и также снижает токсичность селенита;
• L-цистин действует как восстановитель и улучшает восстановление Salmonella.

Обогащённый бульон пересеивают на твёрдую питательную среду. Бульон нельзя инкубировать дольше 24 ч: через 6–12 ч ингибирующее действие селенита снижается.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 4,0 г части B в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 19,01 г части A.
3. Тщательно перемешайте.
4. Нагрейте до полного растворения среды.
5. Разлейте среду в стерильные пробирки.
6. Стерилизуйте в кипящей водяной бане или потоком свободно проходящего пара в течение 10 мин.
7. Не автоклавируйте среду. Чрезмерный нагрев ухудшает её свойства.
8. При наличии большого количества восстановленного селенита приготовленную среду утилизируйте. Признак восстановления — красный осадок на дне пробирки или флакона.

Вместо части B после кипячения в среду можно добавить:

• диски биселенита натрия DD056 — 1 диск на 10 мл среды;
• стержень биселенита натрия DB001 — 1 стержень на 100 мл среды.

Методика проведения анализа

1. Внесите пищевой образец в рекомендованный бульон для предварительного обогащения.
2. Перенесите 1 мл полученной смеси в 10 мл селенит-цистиновой жидкой среды.
3. Параллельно перенесите 1 мл смеси в 10 мл тетратионатного бульона M032.
4. Проведите инкубацию.
5. Выполните последующий пересев на одну или несколько твёрдых сред:
   • агар сульфита висмута M027;
   • ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар M031;
   • энтерический агар Хектоена M467;
   • агар МакКонки M081.

Тип образцов

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые и молочные образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным лабораторным руководствам.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим методикам.

После использования загрязнённые материалы необходимо автоклавировать перед утилизацией.

Ограничения применения

• Некоторые микроорганизмы могут расти слабо из-за различий в их потребностях в питательных веществах.
• Для окончательной идентификации необходимо дополнительно провести серологические и биохимические исследования.
• Не следует инкубировать бульон дольше 24 ч, поскольку ингибирующее действие селенита снижается через 6–12 ч.
• Чрезмерный нагрев среды ухудшает её свойства.
• При появлении большого количества красного осадка восстановленного селенита приготовленную среду следует утилизировать.

Контроль качества

Внешний вид

• Часть A: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Часть B: однородный сыпучий порошок от белого до кремового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Приготовленная полная среда представляет собой светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий раствор.

Реакция среды

Реакция среды при концентрациях 1,9 % масс./об. части A и 0,4 % масс./об. части B, при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2.

pH

Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Характеристики определяли после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч с последующим пересевом на ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар M031.

Характеристики определяли после инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч с последующим пересевом на триптон-соевый агар M290.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.

Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию.

Храните продукт в сухом проветриваем