HiMedia MV688-100G Декарбоксилазный HiVeg бульон Мёллера с лизином

Питательная микробиологическая среда HiMedia MV688-100G Декарбоксилазный HiVeg бульон Мёллера с лизином производства HiMedia — порошковая среда растительного происхождения для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты. Среда применяется для биохимической идентификации грамотрицательных кишечных палочек; концентрация при восстановлении составляет 20,52 г/л, конечный pH — 6,0 ± 0,2 при 25 °C.

Назначение

Декарбоксилазный бульон Мёллера HiVeg с добавлением соответствующей L-аминокислоты используют для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать конкретные аминокислоты. Среда предназначена для дифференциации грамотрицательных кишечных бактерий, включая оценку активности лизиндекарбоксилазы, орнитиндекарбоксилазы и аргининдегидролазы.

Для артикула MV688 в составе предусмотрен гидрохлорид L-орнитина; в исходном наименовании товара указана лизиновая модификация.

Состав

Содержание компонентов, г/л:

Конечный pH при 25 °C: 6,0 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Профиль продукта

Принцип действия и интерпретация

Среды применяют для дифференциации грамотрицательных кишечных бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты. Декарбоксилазный бульон был введён Мёллером для выявления продукции лизиндекарбоксилазы, орнитиндекарбоксилазы и аргининдегидролазы.

Среды HiVeg® изготовлены с заменой пептонов животного происхождения на растительные пептоны, не содержащие рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивной губчатой энцефалопатией.

Продукция орнитиндекарбоксилазы используется как критерий дифференциации видов Klebsiella и Enterobacter: Klebsiella неподвижны и не продуцируют орнитиндекарбоксилазу, тогда как Enterobacter подвижны и продуцируют орнитиндекарбоксилазу, за исключением Enterobacter agglomerans.

Экстракт HiVeg® и пептон HiVeg® обеспечивают бактерии азотистыми питательными веществами. Декстроза является ферментируемым углеводом, а пиридоксаль — кофактором фермента декарбоксилазы. Бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный выполняют функцию индикаторов pH.

После посева бактерий, ферментирующих декстрозу, pH среды снижается вследствие образования кислоты, а цвет индикатора изменяется с пурпурного на жёлтый. Образовавшаяся кислота стимулирует активность фермента декарбоксилазы. При декарбоксилировании лизина образуется кадаверин, при декарбоксилировании орнитина — путресцин. Аргинин сначала гидролизуется до орнитина, который затем декарбоксилируется с образованием путресцина.

Образование аминов повышает pH среды и изменяет цвет индикатора с жёлтого на пурпурный. Если микроорганизм не продуцирует соответствующий фермент, среда остаётся кислой и сохраняет жёлтый цвет.

Каждый исследуемый изолят необходимо также инокулировать в пробирку с базовой средой без аминокислоты.

После инокуляции пробирки необходимо защитить от контакта с воздухом слоем стерильного минерального масла. Воздействие воздуха может вызвать подщелачивание поверхности среды и сделать результат теста недействительным.

Методика приготовления и проведения анализа

1. Приготовьте среду MV393 из расчёта 10,52 г на 1000 мл дистиллированной воды либо среду MV687, MV688 или MV689 из расчёта 20,52 г на 1000 мл дистиллированной воды.
2. При использовании MV393 добавьте 10 г L-лизина, L-аргинина, L-орнитина или другой L-аминокислоты.
3. При использовании DL-аминокислот применяйте концентрацию 2 %.
4. При необходимости нагрейте смесь для полного растворения среды.
5. При добавлении L-орнитина повторно отрегулируйте pH.
6. Разлейте среду по 5 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
7. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C в течение 10 мин и давлении около 0,103 МПа (15 фунтов на кв. дюйм).
8. Для MV687, MV688 или MV689 суспендируйте 20,52 г среды в 1000 мл дистиллированной воды и стерилизуйте описанным выше способом.
9. После инокуляции пробирки покройте стерильным минеральным маслом для защиты от воздуха.
10. Инкубируйте пробирки при 35–37 °C до 4 суток.

Контроль качества

Внешний вид порошка

Цвет: зеленовато-жёлтый.

Состояние: однородный, сыпучий порошок без комков.

Цвет и прозрачность раствора

Раствор: пурпурного цвета, прозрачный, без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 1,05 % масс./об. для MV393 или 2,05 % масс./об. для MV687/MV688/MV689: pH 6,0 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инокуляции пробирок, покрытия стерильным минеральным маслом и инкубации при 35–37 °C в течение до 4 суток.