HiMedia MV687-100G Декарбоксилазный HiVeg бульон Мёллера с орнитином

Питательная среда HiMedia MV687-100G Декарбоксилазный HiVeg бульон Мёллера с орнитином на растительной основе, с конечным pH 6,0 ± 0,2 при 25 °C. Среда предназначена для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты; готовую среду хранят при 2–8 °C.

Назначение

Декарбоксилазный бульон Мёллера применяют для дифференциации грамотрицательных кишечных бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты.

Среда MV687 относится к растительным средам HiVeg® и содержит L-орнитина гидрохлорид. Растительные пептоны HiVeg® используются вместо пептонов животного происхождения; среда не содержит компонентов животного происхождения.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MV687-100G
• Назначение изделия: бульон для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты
• Основа: растительная, HiVeg®
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Тип продукта: HiVeg™
• Материал упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Норма восстановления для MV687: 20,52 г/л
• Объём приготовленной среды из 100 г MV687: 4,87 л
• Конечный pH: 6,0 ± 0,2 при 25 °C
• Стерилизация: автоклавирование при 121 °C в течение 10 мин
• Температура хранения сухой среды: ниже 30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Указанный температурный диапазон: 10–30 °C

Состав

Состав вариантов среды

Значения приведены в граммах на литр.

Конечный pH всех вариантов среды: 6,0 ± 0,2 при 25 °C.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Варианты основы и добавок

• Растительная основа, код MV:
  • MV393, MV687, MV688, MV689
  • пептон HiVeg®
  • экстракт HiVeg®
• Основа животного происхождения, код M:
  • M393, M687, M688, M689
  • пептический перевар тканей животного происхождения
  • мясной экстракт
• Добавка для MV393: аминокислоты.

Принцип измерения и интерпретация

Декарбоксилазные среды применяют для дифференциации грамотрицательных кишечных палочек по способности декарбоксилировать аминокислоты. Декарбоксилазный бульон был предложен Мёллером для выявления образования лизиндекарбоксилазы, орнитиндекарбоксилазы и аргининдегидролазы.

Экстракт HiVeg® и пептон HiVeg® обеспечивают бактерии азотистыми питательными веществами. Декстроза является ферментируемым углеводом, а пиридоксаль — кофактором фермента декарбоксилазы. Бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный выполняют функцию индикаторов pH.

После внесения в среду бактерий, ферментирующих декстрозу, образуются кислоты, pH снижается, а цвет индикатора изменяется с фиолетового на жёлтый. Кислая реакция стимулирует активность фермента декарбоксилазы.

• При декарбоксилировании лизина образуется кадаверин.
• При декарбоксилировании орнитина образуется путресцин.
• Аргинин сначала гидролизуется до орнитина, который затем декарбоксилируется с образованием путресцина.
• Образование аминов повышает pH среды и изменяет цвет индикатора с жёлтого на фиолетовый.
• Если микроорганизм не продуцирует соответствующий фермент, среда остаётся кислой и жёлтой.

Каждый исследуемый изолят также необходимо инокулировать в пробирку с базальной средой без соответствующей аминокислоты.

Образование орнитиндекарбоксилазы используют как дополнительный критерий дифференциации видов Klebsiella и Enterobacter: Klebsiella неподвижны и не продуцируют орнитиндекарбоксилазу, тогда как Enterobacter подвижны и продуцируют орнитиндекарбоксилазу, за исключением Enterobacter agglomerans.

Методика приготовления и стерилизации

1. Для приготовления среды MV393 суспендируйте 10,52 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Для приготовления сред MV687, MV688 или MV689 суспендируйте 20,52 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
3. Для MV393 добавьте 10 г L-лизина, L-аргинина, L-орнитина или другой L-аминокислоты.
4. При использовании DL-аминокислот применяйте концентрацию 2 %.
5. При необходимости нагрейте среду для полного растворения.
6. При добавлении L-орнитина повторно отрегулируйте pH.
7. Разлейте среду по 5 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
8. Стерилизуйте среду автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 10 мин.
9. Среды MV687, MV688 и MV689 стерилизуйте тем же способом: суспендируйте 20,52 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды, затем автоклавируйте при 121 °C в течение 10 мин.

После инокуляции пробирки необходимо изолировать от воздуха слоем стерильного минерального масла. Воздействие воздуха может вызвать защелачивание поверхности среды и сделать результат теста недействительным.

Контроль качества

Внешний вид порошка

Цвет: зеленовато-ж