HiMedia MV621-500G Глюкозо-солевой Teepol HiVeg бульон (Twin Pack)

Микробиологическая питательная среда HiMedia MV621-500G Глюкозо-солевой Teepol HiVeg бульон (Twin Pack) предназначена для обогащения Vibrio parahaemolyticus и морских изолятов из пищевых продуктов, включая морепродукты. Среда применяется для последующего количественного определения вибрионов методом наиболее вероятного числа (МНЧ); для окончательной идентификации необходимы биохимические и серологические тесты.

Назначение и область применения

Глюкозо-солевой бульон Teepol HiVeg применяется для обогащения Vibrio parahaemolyticus из пищевых продуктов и морских изолятов, а также для количественного определения бактерий методом наиболее вероятного числа.

Тип образца: пищевые продукты.

Vibrio parahaemolyticus — грамотрицательная морская бактерия, вызывающая у человека гастроэнтерит пищевого происхождения. Высокая концентрация хлорида натрия — 3 % — способствует обогащению галофильных Vibrio parahaemolyticus. Глюкоза используется бактериями в процессе роста, а Teepol подавляет рост грамположительных микроорганизмов.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик. Животные пептоны полностью заменены растительными пептонами HiVeg®; это позволяет исключить риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Технические характеристики

Приготовление питательной среды

1. Суспендируйте 48,0 г части A в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 4,0 мл части B.
2. Осторожно нагревайте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа или 1,03 бар.

Принцип и интерпретация анализа

Глюкозо-солевой бульон Teepol используют для обогащения Vibrio parahaemolyticus из морепродуктов, а также для количественного определения бактерий методом наиболее вероятного числа.

Пробу необходимо хранить при умеренном охлаждении, примерно при 7–10 °C, и анализировать как можно скорее после отбора. Это повышает вероятность выживания и восстановления вибрионов и снижает риск чрезмерного роста естественной морской микрофлоры.

Пробоподготовка и посев

1. Взвесьте 50 г образца морепродуктов и перенесите в блендер.
2. Добавьте 450 мл фосфатно-солевого буферного раствора (PBS) и гомогенизируйте в течение 1 мин при 8000 об/мин. Полученная суспензия соответствует разведению 1:10.
3. При необходимости приготовьте в PBS дальнейшие разведения 1:100, 1:1000, 1:10000 или более высокие.
4. Внесите три порции по 10 мл разведения 1:10 в три пробирки, содержащие по 10 мл обогатительной среды — глюкозо-солевого бульона Teepol HiVeg® двойной концентрации. Такая постановка соответствует порции образца массой 1 г.
5. Аналогичным образом внесите 10 мл суспензии в пробирку с обогатительной средой одинарной концентрации.
6. Если ожидается высокое содержание Vibrio parahaemolyticus, исследование можно начинать с разведения продукта 1:10.

Выделение и идентификация вибрионов

1. Инкубируйте глюкозо-солевой бульон Teepol в течение ночи при температуре 35 ± 2 °C.
2. Из верхнего 1 см бульона, в котором наблюдается рост, отберите петлёй культуру и выполните штриховой посев на тиосульфат-цитрат-жёлчно-сахарозный агар TCBS HiVeg® (MV189).
3. После инкубации в течение ночи при температуре 35 ± 2 °C на агаре TCBS HiVeg® колонии Vibrio parahaemolyticus имеют округлую форму, зелёную или голубовато-зелёную окраску и диаметр 2,3 мм.
4. Колонии Vibrio alginolyticus крупнее и имеют жёлтую окраску.
5. Проведите дальнейшую идентификацию выделенных колоний биохимическими методами.
6. Для биохимической идентификации Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae и Vibrio vulnificus необходимо засеять соответствующие положительные контрольные микроорганизмы.
7. После окончательной идентификации голубовато-зелёных колоний как Vibrio parahaemolyticus определите исходное положительное разведение в обогатительном бульоне и используйте таблицы метода наиболее вероятного числа для трёх пробирок, чтобы рассчитать количество микроорганизмов.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при температуре 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Внешний вид компонентов

Часть A: однородный свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Часть B: бесцветная вязкая жидкость.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Жёлтый прозрачный раствор с очень небольшим количеством осадка.

Реакция среды

Реакция 4,8 % масс./об. водного раствора с 0,4