HiMedia MV621-500G Глюкозо-солевой Teepol HiVeg бульон (Twin Pack)

Питательный бульон HiMedia MV621-500G Глюкозо-солевой Teepol HiVeg (Twin Pack) для обогащения проб морепродуктов. Применяется для выделения и количественного определения Vibrio parahaemolyticus и других морских изолятов; содержит растительные пептоны для исключения рисков BSE/TSE.

Область применения

Рекомендуется для обогащения проб пищевых продуктов (морепродуктов) с целью выделения Vibrio parahaemolyticus и других морских изолятов. Также используется для подсчета бактерий методом наиболее вероятного числа (МПЧ).

Принцип измерения

Бульон основан на использовании растительных компонентов (HiVeg® пептон и HiVeg® экстракт), обеспечивающих необходимые азотсодержащие питательные вещества. Высокая концентрация хлорида натрия (3 %) способствует эффективному обогащению галофильных бактерий V. parahaemolyticus. Глюкоза служит источником энергии, а Teepol (неионогенное поверхностно-активное вещество) подавляет рост грамположительных организмов.

Методика проведения анализа

Подготовка образца и пробоподготовка

1. Образцы морепродуктов следует хранить при умеренном охлаждении (около 7–10 °C) и анализировать как можно скорее после сбора для обеспечения выживаемости вибрионов и предотвращения разрастания аборигенной морской микрофлоры.
2. Взвесьте 50 г образца морепродуктов в блендере.
3. Добавьте 450 мл фосфатно-солевого буфера (PBS) и перемешивайте в течение 1 мин при 8000 об/мин. Это создает разведение 1:10.
4. При необходимости подготовьте в PBS разведения 1:100, 1:1000, 1:10000 или выше.

Процедура посева и инкубации

1. Внесите три порции по 10 мл разведения 1:10 в три пробирки, содержащие по 10 мл обогатительного бульона (в двойной концентрации). Это соответствует порции в 1 г продукта.
2. Аналогично внесите 10 мл в бульон одинарной концентрации.
3. Если ожидается высокая обсемененность V. parahaemolyticus, анализ можно начать с разведения 1:10.
4. Инкубируйте пробы в течение ночи при температуре 35 ± 2 °C.

Идентификация и подсчет

1. Петлей нанесите культуру с верхнего 1 см бульона, в котором наблюдается рост, на агар TCBS HiVeg® (MV189).
2. После инкубации в течение ночи при 35 ± 2 °C колонии V. parahaemolyticus на агаре TCBS выглядят как круглые, зеленые или голубоватые (диаметром 2,3 мм), в то время как колонии V. alginolyticus крупнее и имеют желтый цвет.
3. Проведите дальнейшую биохимическую характеристику для подтверждения вида.
4. После окончательной идентификации голубо-зеленых колоний как V. parahaemolyticus используйте таблицы МПЧ для трех пробирок для окончательного количественного определения.

Приготовление среды

1. Растворите 48,0 г компонента А в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 4,0 мл компонента Б.
2. Осторожно нагрейте до полного растворения компонентов.
3. Разлейте среду по пробиркам или колбам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Физико-химические параметры

• Внешний вид (Часть А): однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Внешний вид (Часть Б): бесцветная вязкая жидкость.
• Цвет и прозрачность готовой среды: желтый прозрачный раствор с очень небольшим осадком.
• Диапазон pH: 8,60–9,00.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

*Соответствующие номера WDCM.

Дополнительные спецификации

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: 15–25 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия плотно закрывать бутылку для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников воспламенения и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Для окончательной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• Используйте средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Утилизация: использованные среды и материалы, контактировавшие с пробами, должны быть деконтаминированы путем автоклавирования или сжигания.