HiMedia MV621-100G Глюкозо-солевой Teepol HiVeg бульон (Twin Pack)

Питательная микробиологическая среда HiMedia MV621-100G Глюкозо-солевой Teepol HiVeg бульон (Twin Pack) — сухая двухкомпонентная порошковая среда в упаковке HDPE для обогащения Vibrio parahaemolyticus и морских изолятов из пищевых продуктов. Бульон применяют для качественного обнаружения и количественного определения вибрионов методом наиболее вероятного числа; высокая концентрация хлорида натрия 3 % поддерживает обогащение галофильных микроорганизмов, а Teepol подавляет рост грамположительных бактерий.

Назначение

Среда рекомендована для обогащения Vibrio parahaemolyticus и морских изолятов из пищевых продуктов, включая морепродукты. Глюкозо-солевой Teepol HiVeg бульон также применяют для количественного определения бактерий методом наиболее вероятного числа (MPN).

Тип образца: пищевые продукты.

Состав

Состав рассчитан на приготовление среды из компонентов Part A и Part B.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Глюкозо-солевой Teepol бульон используют для обогащения Vibrio parahaemolyticus из морепродуктов, а также для количественного определения бактерий методом наиболее вероятного числа.

Vibrio parahaemolyticus — грамотрицательная морская бактерия, вызывающая у человека гастроэнтерит пищевого происхождения. Пептон HiVeg® и экстракт HiVeg® обеспечивают среду необходимыми азотистыми питательными веществами. Высокая концентрация хлорида натрия — 3 % — способствует обогащению галофильного Vibrio parahaemolyticus. Глюкоза используется бактериями в процессе роста, а Teepol ингибирует рост грамположительных микроорганизмов.

Растительные пептоны полностью заменяют пептон животного происхождения, что исключает риски губчатой энцефалопатии крупного рогатого скота и трансмиссивных губчатых энцефалопатий (BSE/TSE), связанные с применением животных пептонов.

Исследуемую пробу следует хранить при умеренном охлаждении, приблизительно при 7–10 °C, и анализировать как можно скорее после отбора. Такой режим увеличивает выживаемость и выделение вибрионов и снижает вероятность чрезмерного роста естественной морской микрофлоры.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 48,0 г компонента Part A в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 4,0 мл компонента Part B.
2. Осторожно нагревайте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки или колбы в требуемом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов на кв. дюйм (ориентировочно 0,103 МПа).

Пробоподготовка и проведение анализа

1. Взвесьте 50 г образца морепродуктов и поместите в гомогенизатор или блендер.
2. Добавьте 450 мл разбавляющей воды PBS — фосфатно-солевого буферного раствора.
3. Гомогенизируйте пробу в течение 1 мин при скорости 8000 об/мин. Полученная смесь соответствует разведению 1:10.
4. При необходимости приготовьте в PBS разведения 1:100, 1:1000, 1:10000 или более высокие.
5. Внесите три порции по 10 мл разведения 1:10 в три пробирки, содержащие по 10 мл обогатительного бульона Glucose Salt Teepol HiVeg в концентрации 2×. Такая схема соответствует внесению порции образца массой 1 г.
6. Аналогичным образом внесите 10 мл пробы в обогатительный бульон однократной концентрации.
7. Если предполагается высокое содержание Vibrio parahaemolyticus, исследование можно начинать с разведения продукта 1:10.
8. Инкубируйте Glucose Salt Teepol бульон в течение ночи при 35 ± 2 °C.
9. Из верхнего 1-сантиметрового слоя бульона, в котором наблюдается рост, перенесите петлёй культуру и выполните штриховой посев на агар TCBS HiVeg® — тиосульфат-цитрат-жёлчь-сахарозный агар, MV189.
10. Инкубируйте агар TCBS HiVeg® в течение ночи при 35 ± 2 °C.
11. На агаре TCBS HiVeg® колонии Vibrio parahaemolyticus имеют округлую форму, зелёную или голубовато-зелёную окраску и диаметр 2,3 мм. Колонии Vibrio alginolyticus крупнее и окрашены в жёлтый цвет.
12. Проведите дальнейшую идентификацию выделенных колоний биохимическими методами.
13. Для биохимической идентификации Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae и Vibrio vulnificus внесите соответствующие положительные контрольные микроорганизмы.
14. После окончательной идентификации голубовато-зелёных колоний как Vibrio parahaemolyticus определите исходное разведение, давшее положительный результат в обогатительном бульоне, и используйте таблицы MPN для трёх пробирок для окончательного расчёта количества микроорганизмов.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид компонентов

• Part A: однородный, свободно пересыпающийся порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Part B: бесцветная вязкая жидкость.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет: жёлтый.