Питательная микробиологическая среда HiMedia MV503-500G EMB HiVeg бульон представляет собой сухую порошкообразную среду массой 500 г для дифференциации грамотрицательных кишечных бактерий. HiMedia MV503-500G EMB HiVeg бульон применяется для анализа пищевых продуктов и воды, хранится при 10–30 °C и требует стерилизации приготовленной среды автоклавированием.

Назначение

Среда рекомендована для дифференциации грамотрицательных кишечных бактерий в различных образцах, включая пищевые продукты и воду.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эксплуатационных характеристик.

Технические характеристики

Принцип действия и интерпретация

Среды с эозином и метиленовым синим (EMB) первоначально разработаны Holt-Harris и Teague, а позднее модифицированы Levine. EMB HiVeg® бульон объединяет формулы Levine и Holt-Harris–Teague: содержит пептический перевар животной ткани и фосфат, рекомендованные Levine, а также два углевода, предложенные Holt-Harris и Teague.

Состав EMB HiVeg® бульона аналогичен составу EMB HiVeg® агара, за исключением агара.

Метиленовый синий и эозин Y в ограниченной степени подавляют рост грамположительных бактерий. Эти красители служат дифференциальными индикаторами реакции на ферментацию углеводов. Соотношение эозина и метиленового синего составляет приблизительно 6:1.

Сахароза добавлена в среду как альтернативный источник углеводов для типично ферментирующих лактозу грамотрицательных палочек, которые иногда не ферментируют лактозу или ферментируют её медленно. Колиформы поглощают комплекс красителей метиленовый синий–эозин при снижении значения pH, в результате чего бульон приобретает пурпурно-чёрную окраску.

Неферментирующие микроорганизмы, вероятно, повышают значение pH окружающей среды за счёт окислительного дезаминирования белка. Это приводит к растворению комплекса метиленового синего и эозина, вследствие чего бульон становится бесцветным.

Некоторые штаммы видов Salmonella и Shigella не растут в присутствии эозина и метиленового синего.

EMB HiVeg® бульон изготовлен с полной заменой пептона животного происхождения на растительные пептоны для исключения рисков, связанных с BSE/TSE. Пептон HiVeg® служит источником углерода, азота и других необходимых для роста питательных веществ. Лактоза и сахароза являются источниками энергии в качестве ферментируемых углеводов. Эозин Y и метиленовый синий выполняют функцию дифференциальных индикаторов. Дикалий гидрофосфат буферизует среду.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 22,46 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Перемешайте до получения однородной суспензии.
3. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
4. Разлейте среду по ёмкостям.
5. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
6. Не допускайте перегрева.
7. Охладите среду до 45–50 °C.
8. Встряхните среду для окисления метиленового синего, то есть восстановления его синей окраски, и суспендирования хлопьевидного осадка.

Образцы

Тип образца

• Пищевые продукты.
• Вода.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для водных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным нормативам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-розовый или пурпурный однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Красновато-пурпурный опалесцирующий раствор с зеленоватым оттенком и мелкодисперсным осадком в пробирках.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 2,25 % (масса/объём) при 25 °C.

• pH: 7,2 ± 0,2.

Значение pH

• pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее использовавшееся название: Enterobacter aerogenes.

Ограничения применения

Для окончательной идентификации необходимо дополнительно провести биохимические и серологические исследования.

Хранение и срок годности

• Хранение сухой среды: при 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение приготовленной среды: при 15–25 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать контейнер.
• Эксплуатационные характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Хранить среду следует вдали от света, чтобы предотвратить фотоокисление.