Питательная микробиологическая среда HiMedia MV503-100G EMB HiVeg бульон на растительной основе для дифференциации грамотрицательных энтеробактерий. Применяется при анализе проб пищевых продуктов и воды; хранение среды предусмотрено при 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.

Назначение

Бульон EMB HiVeg предназначен для дифференциации грамотрицательных энтеробактерий в различных образцах, включая пробы пищевых продуктов и воды.

Состав

Для приготовления 1 л среды используют:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип измерения и интерпретация

Среды с эозином и метиленовым синим (EMB) первоначально разработаны Holt-Harris и Teague, а позднее модифицированы Levine. Состав EMB HiVeg® Broth объединяет формулы Levine и Holt-Harris и Teague: содержит пептический перевар животной ткани и фосфат, рекомендованные Levine, а также два углевода, предложенные Holt-Harris и Teague. EMB HiVeg® Broth имеет состав, аналогичный EMB HiVeg® Agar, но не содержит агара.

Метиленовый синий и эозин Y в ограниченной степени подавляют рост грамположительных бактерий. Эти красители служат дифференциальными индикаторами при ферментации углеводов. Соотношение эозина и метиленового синего составляет приблизительно 6:1. Сахароза добавлена как альтернативный источник углеводов для типичных лактозоферментирующих грамотрицательных палочек, которые иногда не ферментируют лактозу или ферментируют её медленно.

При снижении pH колиформные бактерии поглощают комплекс красителей метиленового синего и эозина, в результате чего бульон приобретает пурпурно-чёрную окраску. Неферментирующие микроорганизмы, вероятно, повышают pH окружающей среды за счёт окислительного дезаминирования белка; это приводит к растворению комплекса метиленового синего и эозина и образованию бесцветного бульона.

Некоторые штаммы видов Salmonella и Shigella не растут в присутствии эозина и метиленового синего. В среде EMB HiVeg® пептон животного происхождения полностью заменён растительными пептонами для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Функции компонентов

• Пептон HiVeg®: источник углерода, азота и других необходимых для роста питательных веществ.
• Лактоза и сахароза: источники энергии в составе ферментируемых углеводов.
• Эозин Y и метиленовый синий: дифференциальные индикаторы.
• Дикалий фосфорнокислый: буферный компонент среды.

Методика приготовления

1. Взвесьте 22,46 г сухой среды и внесите в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Перемешайте до получения однородной суспензии.
3. При необходимости нагрейте среду для полного растворения.
4. Разлейте среду и стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
5. Не допускайте перегрева.
6. Охладите среду до 45–50 °C.
7. Встряхните среду для окисления метиленового синего, то есть восстановления его синей окраски, и суспендирования хлопьевидного осадка.

Типы образцов

• Пробы пищевых продуктов.
• Пробы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых продуктов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов согласно установленным руководствам.

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов согласно установленным руководствам и местным нормативам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для окончательной идентификации необходимо выполнить дополнительные биохимические и серологические тесты.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Светло-розовый или пурпурный однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор красновато-пурпурного цвета, опалесцирующий, с зеленоватым оттенком и мелкодисперсным осадком в пробирках.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 2,25 % масс./об. при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее название Enterobacter aerogenes.

Условия хранения и срок годности

• Сухую среду храните при 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду храните при 15–25 °C.
• Используйте до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте ёмкость.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются наилучшим образом при использовании в течение указанного срока годности.
• Храните среду вдали от света для предотвращения фотоокисления.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованной или непригодной к применению среды автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими методиками лабораторной работы.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании согласно инструкции на этикетке и в пределах срока годности, если продукт хранился при рекомендованной температуре.

Комплект поставки

• Сухая питательная среда EMB HiVeg®, 100 г.