HiMedia MV463-500G Триптоновая вода, HiVeg (триптоновый бульон)

Обезвоженная питательная среда HiMedia MV463-500G Триптоновая вода, HiVeg (триптоновый бульон) — порошковый микробиологический бульон для лабораторного выявления микроорганизмов, образующих индол. Среда применяется при анализе проб воды и клинического материала; для полной идентификации микроорганизмов требуется дополнительное биохимическое подтверждение.

Назначение

HiMedia MV463-500G предназначена для выявления микроорганизмов, продуцирующих индол, включая дифференциацию бактерий по способности расщеплять триптофан с образованием индола.

Типы исследуемых образцов:

• пробы воды;
• клинический материал: фекалии;
• клинический материал: моча.

Среду можно использовать совместно с бульоном Brilliant Green Bile HiVeg® 2 % (MV121) для определения наиболее вероятного числа (MPN) E. coli в пищевых образцах. Основанием для предположительного теста на E. coli служат рост и образование газа в среде MV121, а также образование индола в триптоновой воде HiVeg® после инкубации обеих сред при 44 ± 1 °C.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

Принцип действия и интерпретация

Триптоновая вода HiVeg® приготовлена с использованием гидролизата HiVeg® вместо триптона, благодаря чему среда не содержит компонентов животного происхождения и не связана с рисками BSE/TSE.

Гидролизат HiVeg® является подходящим субстратом для образования индола благодаря высокому содержанию триптофана и может применяться как альтернатива триптону. Триптоновая вода рекомендована APHA для выявления образования индола колиформными бактериями; этот признак используется при дифференциации бактерий. Модифицированный вариант триптоновой воды (M463I) рекомендован комитетом ISO для той же цели.

Тест демонстрирует способность определённых бактерий гидролизовать аминокислоту триптофан до индола под действием соответствующих ферментов. Освободившийся индол накапливается в питательной среде. Образовавшийся индол выявляют с помощью реактива Ковача или реактива Эрлиха. Индол взаимодействует с альдегидом, содержащимся в реактиве, с образованием красного окрашивания в спиртовом слое. Спиртовой слой экстрагирует и концентрирует красный комплекс.

Для определения индола среду инокулируют чистой культурой возрастом 18–24 ч, инкубируют пробирки при 35 ± 2 °C в течение 18–24 ч, после чего добавляют реактив индола R008. Образование красного кольца в верхней части пробирки указывает на продукцию индола.

Исследование на индол рекомендуется использовать как вспомогательный тест при дифференциации микроорганизмов по способности образовывать индол. Для полной идентификации микроорганизмов необходимо дополнительное биохимическое подтверждение.

Приготовление среды

1. Растворите 15 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки или колбы в требуемом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Методика определения индола

1. Инокулируйте среду посевным материалом из чистой культуры возрастом 18–24 ч.
2. Инкубируйте пробирки при 35 ± 2 °C в течение 18–24 ч.
3. Добавьте непосредственно в пробирку 0,5 мл реактива индола R008.
4. Перемешайте содержимое пробирки.
5. Оставьте пробирку на 5–10 мин.
6. Оцените результат: образование красного кольца в верхней части пробирки указывает на продукцию индола.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель/артикул: MV463-500G
• Назначение изделия: бульон
• Физическая форма: порошок
• Масса: 500 г
• Тип продукта: HiVeg™
• Материал упаковки: ПЭВП (HDPE, полиэтилен высокой плотности)
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения (растительный продукт)
• Концентрация при приготовлении: 15 г/1000 мл
• Конечный pH при 25 °C: 7,5 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,30–7,70
• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C
• Температура инкубации при определении индола: 35 ± 2 °C
• Время инкубации при определении индола: 18–24 ч
• Температура инкубации при совместном использовании с MV121 для предположительного теста на E. coli: 44 ± 1 °C
• Стерилизация: автоклавирование при 121 °C в течение 15 мин

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный свободно сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 1,5 % масс./об. при 25 °C:

• pH: 7,5 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Обозначения:

• # — ранее вид был известен как Enterobacter aerogenes;
• \* — соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Сухой продукт хранить при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду хранить при температуре 15–25 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение заявленного срока годности.

Отбор проб и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с руководствами и местными нормативными требованиями.

Для клинических образцов соблюдайте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Для полной идентификации микроорганизмов необходимо биохимическое подтверждение.
• Тест на индол является вспомогательным методом дифференциации и не заменяет комплексную идентификацию культуры.

Меры безопасности

• Только для применения при диагностике in vitro.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила работы микробиологической лаборатории.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с кли