HiMedia MV463-100G Триптоновая вода, HiVeg (триптоновый бульон)

Порошковая питательная микробиологическая среда HiMedia MV463-100G Триптоновая вода, HiVeg (триптоновый бульон) предназначена для выявления микроорганизмов, образующих индол. Среда применяется для анализа проб воды и клинического материала; для полной идентификации микроорганизмов требуется биохимическое подтверждение.

Назначение и область применения

HiMedia MV463-100G используют для выявления продукции индола микроорганизмами. Триптоновая вода HiVeg рекомендована для обнаружения образования индола колиформными бактериями, что является важным признаком при дифференциации бактерий.

Среду применяют для:

• анализа проб воды;
• исследования клинического материала — фекалий и мочи;
• определения наиболее вероятного числа (НВЧ, MPN) E. coli в пищевых образцах совместно с 2%-ным бульоном Brilliant Green Bile HiVeg (MV121).

При определении НВЧ E. coli основанием для предварительного теста служат рост и образование газа в среде MV121, а также образование индола в триптоновой воде HiVeg после инкубации обеих сред при 44 ± 1 °C.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с установленными параметрами эффективности.

Принцип измерения и интерпретация

Триптоновая вода HiVeg приготовлена с использованием гидролизата HiVeg® вместо триптона, благодаря чему среда не содержит рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE).

Гидролизат HiVeg® является подходящим субстратом для образования индола благодаря высокому содержанию триптофана и может использоваться как альтернатива триптону. Тест демонстрирует способность некоторых бактерий гидролизовать аминокислоту триптофан до индола под действием соответствующих ферментов. Освободившийся индол накапливается в питательной среде.

Для выявления индола используют реактив Ковача или реактив Эрлиха. Индол взаимодействует с альдегидом, содержащимся в соответствующем реактиве, с образованием красного окрашивания в спиртовом слое. Спиртовой слой экстрагирует и концентрирует красный окрашенный комплекс.

Небольшая модификация триптоновой воды — M463I — рекомендована комитетом ISO для той же цели. Рекомендации по применению триптоновой воды для выявления продукции индола колиформными бактериями также приведены APHA.

Методика проведения анализа

1. Инокулируйте среду посевным материалом из чистой культуры, выдержанной 18–24 ч.
2. Инкубируйте пробирки при 35 ± 2 °C в течение 18–24 ч.
3. Добавьте непосредственно в пробирку 0,5 мл реактива для определения индола R008.
4. Перемешайте содержимое пробирки.
5. Оставьте пробирку на 5–10 мин.
6. Образование красного кольца в верхней части пробирки указывает на продукцию индола.

Тест на индол используют как вспомогательный метод дифференциации микроорганизмов по способности образовывать индол. Для полной идентификации микроорганизмов необходимо дополнительное биохимическое подтверждение.

Приготовление среды

1. Растворите 15 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки или колбы в требуемом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,10 МПа).

Типы исследуемых образцов

• Пробы воды.
• Клинические образцы: фекалии.
• Клинические образцы: моча.

Отбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с действующими руководствами и местными нормативами.

Для клинических образцов применяйте установленные методы обращения с материалом в соответствии с действующими руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид среды: однородный, свободно сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Приготовленная среда: прозрачный раствор жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция 1,5%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,5 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,30–7,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Обозначения: # — ранее использовавшееся название Enterobacter aerogenes; \* — соответствующие номера WDCM.

Эксплуатационные характеристики

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в течение срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Для сохранения рабочих характеристик