Нитратный HiVeg бульон HiMedia MV439-100G — сухая питательная среда для выявления способности бактерий восстанавливать нитраты. Состав и критерии эффективности соответствуют стандарту ISO 7932:1993; продукт разработан на основе растительных пептонов, что исключает риски заражения BSE/TSE.

Принцип измерения

Нитратный бульон используется для дифференциации и идентификации различных типов бактерий, в особенности семейства Enterobacteriaceae. Нитрат калия в составе среды служит субстратом: определенные бактерии восстанавливают его до нитритов, аммиака или газообразного азота.

Присутствие нитритов определяется добавлением сульфаниловой кислоты и раствора $\alpha$-нафтиламина. Образование красно-фиолетового окрашивания (реакция Гриесса) свидетельствует о восстановлении нитрата до нитрита. Если окрашивание отсутствует, это означает, что нитрат либо не восстанавливался, либо был восстановлен далее до аммиака или азота. Для проверки добавляют щепотку цинковой пыли: цинк восстанавливает остаточный нитрат до нитрита, вызывая красное окрашивание. Отсутствие красного цвета после добавления цинка подтверждает полное восстановление нитрата.

Методика проведения анализа

Подготовка образца

Для анализа используются изолированные микроорганизмы из клинических и неклинических образцов.

Процедура тестирования

1. В пробирку с исследуемой культурой добавьте по несколько капель сульфаниловой кислоты (R015) и раствора $\alpha$-нафтиламина (R009).
2. Оцените появление красного или розового окрашивания, что указывает на восстановление нитрата.
3. Обязательно протестируйте контрольную (непосеянную) пробирку.
4. При отсутствии розового окрашивания добавьте щепотку цинковой пыли для подтверждения полного отсутствия нитрата в среде.

Приготовление и стерилизация

1. Растворите 9,00 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор до полного растворения компонентов.
3. Разлейте среду по пробиркам, колбам или другим подходящим емкостям.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx 0,1$ МПа) в течение 15 минут.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Эквивалент мясного экстракта

Общие параметры:

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч. Восстановление нитрата определяется после добавления 0,5 мл сульфаниловой кислоты (R015) и 0,5 мл раствора $\alpha$-нафтиламина (R009).

Ключ: (*) соответствующие номера WDCM; (#) ранее именовался Enterobacter aerogenes.

Ограничения и предостережения

• Тест на восстановление нитрата не является подтверждающим; полная идентификация бактерий должна включать морфологию, реакцию по Граму, биохимические и серологические тесты.
• Избыток цинковой пыли может привести к ложноотрицательному результату.
• При использовании $\alpha$-нафтиламина цвет положительной реакции может быстро блекнуть.
• Из-за высокой чувствительности теста необходимо всегда использовать стерильный контроль для проверки отсутствия нитритов в исходной среде.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–30 °C.
• Продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.