HiMedia MV412-100G Spirolate HiVeg бульон, OMATA

Порошкообразная питательная среда HiMedia MV412-100G Spirolate HiVeg бульон, OMATA с конечным pH 7,1 ± 0,2. Бульон предназначен для массового культивирования Treponema pallidum штамма Reiter при производстве антигена и других исследованиях; инкубацию проводят не менее 7 суток при 35–37 °C в анаэробной атмосфере.

Назначение

Среда рекомендована для массового культивирования Treponema pallidum штамма Reiter с целью получения антигена и проведения других исследований. Также может применяться для культивирования других спирохет.

Тип образца: выделенный микроорганизм.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Термин «спирохеты» обычно используют для обозначения видов Treponema и сходных с ними микроорганизмов спиральной морфологии.

Бульон Spirolate, среда OMATA, разработан Omata и Disraely для культивирования оральных фузобактерий. Среда применяется для массового культивирования трепонем Reiter в агаровой среде без агара при производстве антигена и проведении других исследований.

Использование растительных пептонов вместо пептонов животного происхождения позволяет исключить риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE). Гидролизат HiVeg® и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизмы азотистыми факторами роста, минеральными веществами и витаминами группы B.

Функции компонентов среды:

• декстроза служит источником углерода;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды;
• тиогликолят снижает концентрацию кислорода до уровня, оптимального для роста трепонем;
• гидрохлорид L-цистина действует как восстановитель и обладает меньшей токсичностью для фузобактерий;
• добавление TEM-4TR — диацетилового эфира винной кислоты и моноглицеридов животного происхождения — обеспечивает жирными кислотами и усиливает рост трепонем Reiter.

Добавление жирных кислот повышает интенсивность роста трепонем Reiter.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 29,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости добавьте 0,25 г TEM-4TR — диацетилового эфира винной кислоты и моноглицеридов животного происхождения.
3. Нагревайте при частом перемешивании и кипятите в течение 1 мин.
4. Разлейте среду в пробирки, заполняя их наполовину — приблизительно по 15–20 мл в пробирки длиной 6″.
5. При использовании ёмкостей большего объёма поддерживайте соотношение площади поверхности к объёму, аналогичное соотношению для пробирок.
6. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
7. Охладите среду до 45–50 °C.
8. Добавьте стерильную инактивированную сыворотку овечьего, кроличьего или крупного рогатого скота в концентрации 10 % (об./об.).

Сбор и подготовка образца

Засейте бульон Spirolate аликвотой 0,05 мл семисуточной чистой культуры, выращенной в тиогликолевой среде без индикатора с добавлением 10 % инактивированной сыворотки овечьего, кроличьего или крупного рогатого скота.

Инкубируйте не менее 7 суток при 35–37 °C в анаэробной атмосфере.

Культуральные характеристики

Характеристики определяют после инкубации в течение не менее 7 суток при 35–37 °C в анаэробных условиях с добавлением 10 % инактивированной сыворотки овечьего, кроличьего или крупного рогатого скота.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета, без комков.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный или слегка опалесцирующий раствор светло-соломенного цвета.

Реакция среды

Реакцию определяют для 2,9 % (масс./об.) водного раствора при 25 °C.

pH: 7,1 ± 0,2.

Ожидаемые рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Хранить сухой продукт при 10–30 °C в плотно закрытой упаковке.
• Приготовленную среду хранить при 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать упаковку.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются наилучшим образом при использовании в течение установленного срока годности.

Ограничения применения

Для предотвращения ошибочных результатов рекомендуется использовать чистую культуру возрастом 7 суток.

Меры предосторожности

Перед вскрытием упаковки прочитайте этикетку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Утилизацию инфекционных материалов выполняйте в соответствии с установленными лабораторными процедурами. Материалы, контактировавшие с клиническим образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими методиками лабораторной работы.

Сравнительный контекст

В отличие от сред на основе пептонов животного происхождения, Spirolate HiVeg® использует растительный гидролизат и не содержит компонентов животного происхождения; добавление TEM-4TR обеспечивает источник жирных кислот для усиления роста трепонем Reiter.