HiMedia MV412-100G Spirolate HiVeg бульон, OMATA

Сухая питательная среда Spirolate HiVeg бульон, OMATA HiMedia MV412-100G для массового культивирования Treponema pallidum (штамм Рейтера). Применяется для производства антигенов и других исследований спирохет; вес упаковки составляет 100 г.

Принцип измерения

Среда Spirolate Broth, OMATA была разработана для культивирования оральных фузобактерий и используется для массового выращивания трепонем Рейтера в безагаровом бульоне. В данной модификации (HiVeg®) животные пептоны заменены на растительные, что исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией).

Основные компоненты и их функции:

• Гидролизат HiVeg® и экстракт дрожжей: обеспечивают азотистые факторы роста, минералы и витамины группы B.
• Декстроза: служит источником углерода.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс среды.
• Тиогликоллат натрия: минимизирует парциальное давление кислорода, создавая оптимальные условия для роста трепонем.
• L-цистин гидрохлорид: выступает в роли восстановителя и обладает меньшей токсичностью для фузобактерий.
• Добавка TEM-4TR (диацил-тартратный эфир моноглицеридов животного происхождения): обеспечивает поступление жирных кислот, которые стимулируют рост трепонем Рейтера.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Растворить 29,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости добавить 0,25 г TEM-4TR.
3. Нагревать при частом перемешивании и довести до кипения на 1 минуту.
4. Разлить в пробирки, заполняя их наполовину (примерно 15–20 мл для пробирок длиной 152 мм (6″)). При использовании более крупных контейнеров следует поддерживать соотношение площади поверхности к объему, аналогичное пробиркам.
5. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
6. Охладить до 45–50 °C и добавить стерильную инактивированную сыворотку (овечью, кроличью или бычью) в концентрации 10 % об/об.

Процедура посева и инкубации

1. В бульон Spirolate внести аликвоты по 0,05 мл чистой 7-дневной культуры, выращенной в тиогликоллатной среде без индикатора с добавлением 10 % инактивированной сыворотки (овечьей, кроличьей или бычьей).
2. Инкубировать в анаэробной атмосфере при температуре 35–37 °C в течение минимум 7 дней.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-соломенный прозрачный или слегка опалесцирующий раствор.
• Реакция: pH 2,9 % (масса/объем) водного раствора при 25 °C составляет 7,1 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением 10 % инактивированной сыворотки (овечьей/кроличьей/бычьей) после инкубации при 35–37 °C в течение минимум 7 дней в анаэробных условиях.

Область применения и ограничения

Среда рекомендуется для массового культивирования Treponema pallidum (штамм Рейтера) с целью получения антигенов, а также для выращивания других видов спирохет.

Ограничения: Для предотвращения ошибочных результатов рекомендуется использовать чистую культуру, прошедшую 7 дней роста.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть для предотвращения комкования. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и образцами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности: использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Утилизация отработанных или непригодных препаратов должна осуществляться путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.