HiMedia MV287-100G EE HiVeg бульон, Моссель

Порошковая питательная среда HiMedia MV287-100G EE HiVeg бульон, Моссель предназначена для селективного обогащения энтеробактерий и имеет растительную основу без компонентов животного происхождения. HiMedia MV287-100G применяют при бактериологическом исследовании пищевых продуктов; подготовленную среду стерилизуют кипячением, автоклавирование запрещено.

Назначение

EE HiVeg® Broth / Modified используют для селективного обогащения представителей семейства Enterobacteriaceae при бактериологическом исследовании пищевых продуктов.

Рекомендуемое применение: селективное обогащение Enterobacteriaceae.

Состав

Состав приведён для вариантов MV287 и MV287A:

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам рабочих характеристик.

Технические характеристики

Варианты состава и кодировки

Растительная основа, код MV:

• MV287/MV287A;
• пептон HiVeg®;
• пептон HiVeg® № 2;
• синтетическое моющее средство № II.

Основа животного происхождения, код M:

• M287/M287A;
• пептический перевар тканей животного происхождения;
• панкреатический перевар желатина;
• бычья желчь.

Для HiMedia MV287-100G используется вариант MV287.

Расход сухой среды и объём приготовления

• Восстановление MV287: 43,5 г/л.
• Восстановление MV287A: 45 г/л.
• Объём подготовленной среды из 500 г MV287: 11,49 л.
• Объём подготовленной среды из 100 г MV287: 2,29 л.
• Объём подготовленной среды из 500 г MV287A: 11,11 л.

Принцип действия и интерпретация

В средах EE HiVeg® пептоны животного происхождения заменены растительными пептонами. Среда EE HiVeg® представляет собой модификацию среды EE, разработанной Mossel et al. и рекомендованной в качестве обогатительной среды для Enterobacteriaceae при бактериологическом исследовании пищевых продуктов и кормов для животных.

Пептон HiVeg®, пептон HiVeg® № 2 и декстроза способствуют росту большинства представителей Enterobacteriaceae, обеспечивая выявление Salmonella и других микроорганизмов, не ферментирующих лактозу. Бриллиантовый зелёный и синтетическое моющее средство № II выполняют функцию селективных агентов и подавляют грамположительные бактерии.

Образование кислоты вызывает изменение цвета среды с зелёного на жёлтый. При отрицательной реакции изменения цвета не происходит, среда остаётся зелёной. Фосфаты обеспечивают буферные свойства среды.

Предусмотрена растительная основа без компонентов животного происхождения; среда не содержит факторов риска BSE/TSE, связанных с использованием материалов животного происхождения.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 43,5 г MV287 или 45 г MV287A в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Распределите среду по 100 мл в колбы объёмом 250 мл.
3. Закройте колбы ватными пробками или неплотно прилегающими крышками.
4. Нагревайте среду в свободно протекающем паре или кипящей воде в течение 30 мин.
5. Не допускайте перегрева: среда чувствительна к воздействию тепла.
6. Быстро охладите среду в холодной проточной воде.
7. Не автоклавируйте среду.

Пробоподготовка и восстановление повреждённых клеток

Enterobacteriaceae могут повреждаться в процессе обработки пищевых продуктов при воздействии низкой температуры, недостаточного нагрева, высушивания, радиации, консервантов или санитарно-гигиенических средств.

Для восстановления повреждённых клеток используйте хорошо аэрируемый бульон Tryptone Soya HiVeg® MV011. Повреждённые клетки выдерживают в нём 2 ч при 25 °C, после чего проводят обогащение в среде EE HiVeg®.

Применение после обогащения

EE HiVeg® является обогатительным бульоном и должен применяться совместно с агаром Violet Red Glucose HiVeg® MV581.

После обогащения необходимо выполнять пересев на дифференциальные лактозные среды для выявления микроорганизмов, не ферментирующих лактозу, или микроорганизмов с замедленной ферментацией лактозы:

• агар MacConkey HiVeg® MV081;
• агар Deoxycholate Citrate HiVeg® MV065;
• агар Brilliant Green HiVeg® MV016.

Контроль качества

Инкубацию можно проводить в одном из следующих режимов — в зависимости от температурных характеристик восстанавливаемых организмов:

• при температуре выше 42 °C в течение 18 ч;
• при 32 °C в течение 24–48 ч;
• при 4 °C в течение 10 суток.

Внешний вид и свойства раствора

• Внешний вид порошка: порошок зеленовато-жёлтого цвета, однородный, сыпучий.
• Цвет и прозрачность: раствор изумрудно-зелёного цвета, прозрачный, без осадка.
• Реакция: водный раствор MV287 концентрацией 4,35 % масс./объём или MV287A концентрацией 4,5 % масс./объём имеет pH 7,2 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдали после инкубации при 35 °C в течение 20–24 ч.

Ограничения применения

• Среда чувствительна к нагреву; перегрев при приготовлении не допускается.
• Автоклавирование запрещено.
• Для восстановления повреждённых клеток требуется предварительная выдержка в хорошо аэрируемом бульоне Tryptone Soya HiVeg® MV011 в течение 2 ч при 25 °C.
• EE HiVeg® используют как обогатительный бульон совместно с последующим пересевом на дифференциальные лактозные агары.

Хранение

• Сухая среда: хранить при температуре ниже 30 °C.
• Подготовленная среда: хранить при 2–8 °C.

Сравнительный контекст

Вариант MV287 содержит пептон HiVeg®, декстрозу, фосфат динатрия и бриллиантовый зелёный в концентрации 0,0135 г/л, тогда как вариант MV287A содержит пептон HiVeg® № 2, моногидрат глюкозы, дигидрат фосфата динатрия и бриллиантовый зелёный в концентрации 0,15 г/л.

Совместимые среды и компоненты

• Tryptone Soya HiVeg® Broth MV011 — восстановление повреждённых клеток перед обогащением.
• Violet Red Glucose HiVeg® Agar MV581 — среда для последующего применения совместно с EE HiVeg®.
• MacConkey HiVeg® Agar MV081 — дифференциальная лактозная среда.
• Deoxycholate Citrate HiVeg® Agar MV065 — дифференциальная среда.
• Brilliant Green HiVeg® Agar MV016 — среда для выявления микроорганизмов, не ферментирующих лактозу, и микроорганизмов с замедленной ферментацией лактозы.