HiMedia MV1453-100G Быстрый HiColiform HiVeg бульон

Питательная микробиологическая среда HiMedia MV1453-100G Быстрый HiColiform HiVeg бульон предназначена для выявления Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды с использованием хромогенного и флуорогенного субстратов. Бульон применяют для обнаружения и подтверждения санитарно-показательных микроорганизмов; обезвоженный порошок и приготовленную среду хранят при 2–8 °C.

Назначение

Rapid HiColiform HiVeg® Broth применяют для выявления и подтверждения Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды. Определение основано на совместном использовании хромогенного и флуорогенного субстратов.

Среда изготовлена без компонентов животного происхождения: животные пептоны полностью заменены растительными пептонами. Состав представляет собой модификацию Rapid HiColiform Broth, который, в свою очередь, является модификацией бульона LMX, описанного Manafi и Kneifel.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация результатов

Флуорогенный субстрат расщепляется ферментом β-D-глюкуронидазой, специфично присутствующим у Escherichia coli. Положительная реакция сопровождается появлением синей флуоресценции при ультрафиолетовом освещении.

Присутствие общих колиформных бактерий определяется по сине-зелёному окрашиванию среды, возникающему при расщеплении хромогенного субстрата.

IPTG усиливает синтез ферментов и повышает активность β-D-галактозидазы.

Для подтверждения присутствия E. coli поверхность среды покрывают реактивом Ковача. При положительной реакции в течение 2 мин на границе раздела образуется красное кольцо.

Функции компонентов среды:

• Специальный пептон HiVeg®, богатый триптофаном, обеспечивает необходимые питательные вещества для роста и позволяет одновременно выявлять образование индола.
• Сорбитол служит источником углерода.
• Фосфатные соли обеспечивают буферное действие, необходимое для быстрого роста колиформных бактерий.
• Лаурилсульфат натрия придаёт среде селективность за счёт подавления сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных микроорганизмов.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 16,03 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Для приготовления бульона двойной концентрации суспендируйте 32,06 г MV1453 в 1000 мл дистиллированной воды.
3. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Тщательно перемешайте и разлейте приготовленную среду в необходимом объёме.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 1,60 % масс./об. при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения обезвоженного порошка: 2–8 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до истечения срока годности, указанного на этикетке.