Микробиологический питательный бульон HiMedia MV127-500G EC HiVeg производства HiMedia — сухая безживотная среда на основе растительных пептонов. Бульон применяют для селективного количественного определения предположительных Escherichia coli методом наиболее вероятного числа (МПЧ), но не используют для прямого выделения колиформных бактерий без предварительного обогащения.

Назначение

Бульон EC HiVeg предназначен для селективного количественного определения предположительных Escherichia coli методом наиболее вероятного числа (МПЧ).

Среду применяют для выявления колиформных бактерий при бактериологическом исследовании:

• воды;
• молока;
• пищевых продуктов;
• ракообразных и других образцов, для которых требуется выделение Escherichia coli.

Среда EC HiVeg разработана на основе бульона EC, при этом пептоны животного происхождения полностью заменены растительными пептонами. Это позволяет исключить риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE).

Состав

Для приготовления 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Среду EC применяют для выявления колиформных бактерий при бактериологическом исследовании воды, молока и пищевых продуктов. Среда первоначально описана Hajna и Perry. Позднее Fishbein и Surkiewicz использовали её для подтверждающих тестов на Escherichia coli. Среда также применяется в методах МПЧ и часто используется для подтверждения наличия колиформных бактерий.

Гидролизат HiVeg® обеспечивает среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью и другими необходимыми питательными веществами для роста. Лактоза служит сбраживаемым сахаром. Синтетическое моющее вещество № 1 подавляет грамположительные бактерии, особенно бациллы и фекальные стрептококки. Фосфаты контролируют pH в процессе сбраживания лактозы.

Образование газа в ферментационной трубке в течение 24 ч или менее является предположительным признаком присутствия колиформных бактерий.

Среду используют в следующих режимах:

• при 37 °C — для выявления колиформных микроорганизмов;
• при 44,5 °C — для выделения Escherichia coli из воды и ракообразных;
• при 45,5 °C — для исследования пищевых продуктов.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 37,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду по пробиркам, содержащим перевёрнутые трубки Дюрхема.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,10 МПа).
5. При необходимости скорректируйте концентрацию среды с учётом объёма исследуемого образца.

При использовании образца объёмом более 10 мл среду необходимо восстановить в концентрации, эквивалентной указанной в инструкции, после добавления образца.

Методика подтверждающего анализа

1. Перенесите петлёй культуру из всех пробирок с бульоном Лаурилсульфат HiVeg® (MV080), в которых в течение 24 ч образовался газ.
2. Также перенесите культуру из всех пробирок, в которых в течение 48 ч наблюдался бактериальный рост, в пробирки с бульоном EC HiVeg.
3. Не позднее чем через 30 мин после внесения посевного материала поместите пробирки в водяную баню.
4. Инкубируйте пробирки при 44 °C в течение 24 ч.
5. Рост с образованием газа расценивайте как положительную реакцию.
6. Рассчитайте плотность фекальных колиформных микроорганизмов с использованием таблиц МПЧ.

Ложноотрицательные реакции при восстановлении колиформных бактерий из систем водоснабжения могут возникать вследствие:

• низкого pH;
• охлаждения образца;
• применения бактерицидных или бактериостатических веществ.

Интерпретация газообразования

• Газообразование при 44,5 °C или 45,5 °C, а также при 37 °C указывает на присутствие Escherichia coli и, возможно, других колиформных бактерий.
• Газообразование при 37 °C указывает на присутствие колиформных бактерий без Escherichia coli.

Тип исследуемого образца

• Пищевые продукты.
• Вода.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых продуктов и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Для идентификации микроорганизмы должны находиться в чистой культуре.
• Для окончательной идентификации необходимо выполнить морфологические, биохимические и/или серологические тесты.
• Бульон EC HiVeg не следует использовать для прямого выделения колиформных бактерий, поскольку для оптимального восстановления фекальных колиформных бактерий требуется предварительное обогащение в предположительной среде.

Контроль качества

Ожидаемые характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке и в пределах срока годности при хранении при рекомендованной температуре.

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Жёлтый прозрачный раствор без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 3,7 % масс./об. при 25 °C:

• pH: 6,9 ± 0,2.

Диапазон pH

Диапазон pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 44,5 °C ± 0,2 °C в течение 24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее известен как Enterobacter aerogenes.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель/артикул: MV127-500G
• Наименование: EC HiVeg бульон
• Тип продукта: питательный бульон
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 500 г
• Происхождение пептонов: без компонентов животного происхождения, растительные
• Основной сбраживаемый углевод: лактоза
• Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,70–7,10
• Материал упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C