Питательная микробиологическая среда HiMedia MV127-100G EC HiVeg бульон — сухая порошкообразная среда без компонентов животного происхождения для селективного количественного определения предположительно Escherichia coli методом наиболее вероятного числа (MPN). Применяется при бактериологическом исследовании воды, молока и пищевых продуктов, но не предназначена для прямого выделения колиформных бактерий без предварительного обогащения в предположительной среде.

Назначение

Бульон EC HiVeg предназначен для селективного количественного определения предположительно Escherichia coli методом наиболее вероятного числа (MPN), а также для подтверждающего выявления колиформных бактерий при бактериологическом исследовании:

• воды;
• молока и молочных продуктов;
• пищевых продуктов;
• моллюсков.

Среда может применяться при 37 °C для выявления колиформных микроорганизмов, при 44,5 °C — для выделения Escherichia coli из воды и моллюсков, а также при 45,5 °C — для исследования пищевых продуктов.

Бульон EC HiVeg не следует использовать для прямого выделения колиформных бактерий: для оптимального восстановления фекальных колиформных бактерий требуется предварительное обогащение в предположительной среде.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Среда не содержит компонентов животного происхождения: пептоны животного происхождения полностью заменены растительными пептонами для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Принцип действия и интерпретация

Бульон EC применяется для выявления колиформных бактерий при бактериологическом исследовании воды, молока и пищевых продуктов. Среда первоначально была описана Хайной и Перри, позднее использовалась Фишбейном и Суркевичем для подтверждающих исследований на Escherichia coli. Бульон также применяется в методах MPN и часто используется для подтверждения наличия колиформных бактерий.

Гидролизат HiVeg® обеспечивает среду азотсодержащими и углеродсодержащими соединениями, аминокислотами с длинной цепью и другими необходимыми питательными веществами для роста. Лактоза является сбраживаемым сахаром. Синтетическое моющее средство № 1 подавляет грамположительные бактерии, особенно бациллы и фекальные стрептококки. Фосфаты поддерживают значение pH во время ферментации лактозы.

Образование газа в ферментационной трубке в течение 24 ч или менее является предположительным признаком присутствия колиформных бактерий. Процедура с использованием среды EC позволяет получить информацию о происхождении бактерий группы кишечной палочки — фекальном или нефекальном — при применении в качестве подтверждающего теста.

Интерпретация образования газа

• Образование газа при 44,5 °C или 45,5 °C, а также при 37 °C: Escherichia coli и, возможно, другие колиформные бактерии.
• Образование газа при 37 °C: колиформные бактерии без Escherichia coli.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 37,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки, содержащие перевёрнутые трубки Дюрхама.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм², ориентировочно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
5. После добавления образца скорректируйте концентрацию среды в соответствии с объёмом образца.

Методика подтверждающего анализа

Если объём образца превышает 10 мл, среду необходимо восстановить в концентрации, эквивалентной указанной в инструкции по приготовлению, с учётом последующего добавления образца.

1. Перенесите петлёй культуру из всех пробирок с бульоном лаурилсульфатным HiVeg® (MV080), в которых наблюдалось образование газа в течение 24 ч.
2. Также перенесите культуру из всех пробирок, в которых наблюдался бактериальный рост в течение 48 ч.
3. Перенос выполняйте в пробирки с бульоном EC HiVeg®.
4. В течение 30 мин после внесения посевного материала поместите пробирки в водяную баню.
5. Инкубируйте пробирки при 44 °C в течение 24 ч.
6. Рост с образованием газа считайте положительной реакцией.
7. Рассчитайте плотность фекальных колиформных бактерий по таблицам MPN.

Ложноотрицательные реакции при восстановлении колиформных бактерий из систем водоснабжения могут возникать вследствие низкого pH, охлаждения, а также применения бактерицидных или бактериостатических веществ.

Тип образцов

• Пищевые продукты.
• Вода.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб с учётом руководств и местных нормативных требований.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

• Для идентификации микроорганизмы должны находиться в чистой культуре.
• Для окончательной идентификации необходимо выполнить морфологические, биохимические и/или серологические исследования.
• Среда не предназначена для прямого выделения колиформных бактерий без предварительного обогащения в предположительной среде.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, легко сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Жёлтый прозрачный раствор без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 3,7 % при 25 °C.

• pH: 6,9 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 44,5 °C ± 0,2 °C в течение 24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

** Ранее обозначался как Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

Технические характеристики