HiMedia MV1252-500G HiVeg бульон Ханахана

Питательная микробиологическая среда HiMedia MV1252-500G HiVeg бульон Ханахана — сухой растительный бульон без компонентов животного происхождения для культивирования рекомбинантных штаммов Escherichia coli. Среда применяется при подготовке и трансформации компетентных клеток; масса упаковки составляет 500 г, объём приготовленной среды — 17,85 л.

Назначение

Бульон Ханахана HiVeg® рекомендован для культивирования рекомбинантных штаммов Escherichia coli. Питательная среда используется при подготовке и трансформации компетентных клеток.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Бульон Ханахана HiVeg® приготовлен с использованием растительных пептонов, не содержащих рисков BSE/TSE, связанных с пептонами животного происхождения. Среда представляет собой модификацию бульона Ханахана, приготовленного по рецептуре, описанной Hanahan, и рекомендована для культивирования рекомбинантных штаммов Escherichia coli.

Бульон является богатой питательной средой, используемой при подготовке и трансформации компетентных клеток. Для введения ДНК компетентные клетки сначала выращивают в бульоне Ханахана HiVeg®, чтобы подготовить клетки к перфорации. Для выживания перфорированных компетентных клеток необходима богатая изотоническая среда.

Бульон Ханахана HiVeg® с 0,4 % декстрозы, как и традиционная среда, используется на заключительной стадии трансформации. Среда обеспечивает Escherichia coli источник углерода и энергии, способствует восстановлению перфораций и репликации.

Гидролизат HiVeg® и дрожжевой экстракт поставляют азотистые соединения и факторы роста, необходимые рекомбинантным клеткам Escherichia coli для восстановления после стресса трансформации и последующего роста. Хлорид калия и хлорид натрия поддерживают изотонические условия. Сульфат магния добавлен как необходимый компонент для репликации ДНК.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 28 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление 15 фунтов соответствует ориентировочно 0,103 МПа.

Профиль продукта

В отличие от варианта на животной основе M1252, продукт MV1252 содержит гидролизат HiVeg® растительного происхождения.

• Рекомендуемое применение: культивирование рекомбинантных штаммов Escherichia coli
• Расход сухой среды для приготовления: 28,0 г/л
• Объём приготовленной среды из упаковки 500 г: 17,85 л
• pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2
• Добавки: отсутствуют
• Стерилизация: 121 °C, 15 мин
• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C
• Хранение приготовленной среды: 2–8 °C

Контроль качества

Внешний вид порошка

Порошок светло-жёлтого цвета, может иметь слегка зеленоватый оттенок; однородный, сыпучий.

Цвет и прозрачность раствора

Среда образует раствор янтарного цвета; раствор прозрачный, без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 2,8 % мас./об. составляет pH 7,0 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

• Артикул: MV1252-500G
• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: бульон
• Масса: 500 г
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C; предельное условие производителя — ниже 30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечный pH: 7,0 ± 0,2 при 25 °C
• Рекомендуемая концентрация при восстановлении: 28,0 г/л
• Дополнительные добавки: не требуются
• Режим стерилизации: 121 °C в течение 15 мин

Культуральное применение

Среда предназначена для выращивания рекомбинантных штаммов Escherichia coli, подготовки компетентных клеток, восстановления клеток после трансформации и обеспечения условий для репликации ДНК.