HiMedia MV1090-100G HiVeg бульон для идентификации листерий

Микробиологическая питательная среда HiMedia MV1090-100G HiVeg бульон для идентификации листерий на растительной пептонной основе предназначена для селективного обогащения и идентификации видов Listeria. HiMedia MV1090-100G применяют для анализа пищевых продуктов и молочных образцов; после инкубации при 30 °C в течение 24–48 ч бульон используют для высева на селективные агары PALCAM или Oxford.

Назначение

Назначение: селективное обогащение и идентификация видов Listeria.

Тип образцов: пищевые продукты и молочные образцы.

Назначение изделия: бульон.

Масса: 100 г.

Пептонная основа HiVeg® полностью заменяет пептон животного происхождения, что позволяет исключить риски, связанные с BSE/TSE — губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

Принцип действия и интерпретация результатов

Бульон для идентификации листерий, также известный как бульон PALCAM — полимиксин-акрифлавин-хлорид лития-цефтазидим-эскулин-маннитол, — предназначен для селективного обогащения видов Listeria.

Пептон HiVeg® и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродсодержащими соединениями, аминокислотами с длинной цепью и другими питательными веществами, необходимыми для роста.

Высокая концентрация хлорида лития и селективная добавка PALCAM Selective Supplement (FD061), содержащая полимиксин B, гидрохлорид акрифлавина и цефтазидим, подавляют сопутствующую микрофлору и обеспечивают рост видов Listeria.

Соевый лецитин обладает свойствами, аналогичными свойствам яичного желтка, поэтому дополнительное добавление эмульсии яичного желтка не требуется.

Комбинация маннитола и фенолового красного позволяет выявлять ферментацию маннитола, а эскулин в сочетании с цитратом аммония и железа — гидролиз эскулина.

L. monocytogenes гидролизует эскулин, в результате чего среда окрашивается в чёрный цвет. L. monocytogenes не ферментирует маннитол, поэтому может быть дифференцирована от таких загрязняющих микроорганизмов, как Enterococci и Staphylococci: последние ферментируют маннитол и вызывают изменение окраски среды с красной на жёлтую.

Инкубация в микроаэрофильных условиях подавляет строгие аэробы, включая виды Bacillus и Pseudomonas.

Методика выделения L. monocytogenes зависит от исследуемого материала. Обычно образец сначала вносят в бульон для обогащения, чтобы обеспечить размножение микроорганизмов перед выделением и идентификацией. В зависимости от типа образца выбирают соответствующий метод и селективный бульон для обогащения.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 23,7 г сухой среды в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Простерилизуйте среду автоклавированием при давлении 15 фунтов (около 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильно восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки PALCAM Selective Supplement (FD061).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные пробирки или колбы в необходимом объёме.

Методика проведения анализа

1. После инкубации приготовленного бульона при 30 °C в течение 24–48 ч отберите приблизительно 0,1 мл бульона.
2. Выполните штриховой посев на селективный агар для Listeria, например на агар для идентификации листерий HiVeg® (PALCAM) (MV1064) или агар Oxford HiVeg® для листерий (MV1145).
3. Интерпретируйте рост и изменение окраски среды с учётом ферментации маннитола и гидролиза эскулина.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид: однородный легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор красного цвета без осадка.

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 4,74 % масс./об. при 25 °C; pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки PALCAM Selective Supplement (FD061) и инкубации при 30 °C в течение 24–48 ч.

Пробоотбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно действующим руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно действующим руководствам и местным нормативам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Из-за вариаций питательных потребностей некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.

Метод и селективный бульон для обогащения необходимо выбирать с учётом типа исследуемого образца.

Условия хранения и срок годности

Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.

Условия хранения: плотно закрытый контейнер, сухое проветриваемое помещение, защита от экстремальных температур и источников воспламенения.

После вскрытия необходимо хранить продукт в сухом виде и плотно закрывать флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.

Неправильное хранение может привести к образованию комков. После использования контейнер следует плотно закрывать.

Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.

Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Эффективность среды обеспечивается при использовании в пределах установленного срока годности и при соблюдении условий, указанных на этикетке.

Требования безопасности

Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.

Сухую среду, образцы и культуры должны обрабатывать только обученные сотрудники.

При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.

При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.

Дополнительные требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо утилизировать безопасным способом с применением автоклавирования и/или сжигания.

Утилизацию инфекционных материалов выполняйте в соответствии с установленными лабораторными процедурами. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы согласно действующим лабораторным методикам.

Совместимые среды и добавки

• PALCAM Selective Supplement (FD061) — селективная добавка, содержащая полимиксин B, гидрохлорид акрифлавина и цефтазидим.
• Агар для идентификации листерий HiVeg® (PALCAM) (MV1064).
• Агар Oxford HiVeg® для листерий (MV1145).