Микробиологический бульон HiMedia MV1046-500G MUG лаурилсульфатный HiVeg бульон — сухая питательная среда для флуорогенного выявления Escherichia coli в пробах воды и пищевых продуктов. Среда применяется при инкубации посевов при 35 °C в течение 24 ч с последующей оценкой флуоресценции под УФ-светом с длиной волны 366 нм; масса упаковки — 500 г.

Назначение

Среда предназначена для выявления Escherichia coli в пробах воды и пищевых продуктов флуорогенным методом. Также лаурилсульфатный бульон применяется для выявления и количественного определения колиформных микроорганизмов в пищевых продуктах, воде и сточных водах.

Тип продукта: HiVeg™
Физическая форма: порошок
Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
Тип упаковки: флакон из полиэтилена высокой плотности (HDPE)
Масса: 500 г

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности среды.

Принцип действия и интерпретация

Лаурилсульфатный бульон разработан Mallmann и Darby и рекомендован APHA для выявления и количественного определения колиформных микроорганизмов в пищевых продуктах, воде и сточных водах.

MUG добавляют в лаурилсульфатный бульон как флуорогенное соединение. При наблюдении под УФ-светом MUG обеспечивает быстрое выявление Escherichia coli; в таких случаях дальнейшее подтверждение может не требоваться. MUG позволяет выявлять не газообразующие штаммы, которые могут оставаться необнаруженными при использовании обычной методики.

MUG-содержащая среда используется для определения активности β-глюкуронидазы. Активность β-глюкуронидазы выявлена у 96–100 % штаммов Escherichia coli, у 17 % видов рода Salmonella и у 40 % видов рода Shigella; для других родов активность была отрицательной.

Для слабоположительных штаммов инкубацию следует проводить в течение ночи. По опубликованным данным, ложноотрицательные результаты не выявлялись, а доля ложноположительных результатов составляла около 5 %.

Модифицированный MUG лаурилсульфатный бульон HiVeg® изготовлен с применением пептонов растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения, что исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией (BSE/TSE).

Гидролизат HiVeg® обеспечивает питательными веществами, лактоза служит источником энергии. Лаурилсульфат натрия ингибирует многие микроорганизмы, кроме колиформных. 4-метилумбеллиферил β-D-глюкуронид гидролизуется ферментом β-глюкуронидазой, присутствующим у ряда микроорганизмов, с образованием 4-метилумбеллиферона — флуоресцирующего конечного продукта реакции.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 35,65 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте среду по пробиркам с перевёрнутыми трубками Дюрхема. Объём среды выбирают с учётом объёма исследуемой пробы.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов на кв. дюйм (примерно 0,103 МПа).

Типы исследуемых образцов

• Пищевые продукты.
• Вода.

Отбор проб и проведение анализа

1. Внесите по 10 мл исследуемой пробы в три пробирки с одно- и трёхкратной концентрацией среды.
2. Инкубируйте пробирки при 35 °C в течение 24 ч.
3. Оцените помутнение среды и образование газа.
4. Для подтверждения предположительного наличия E. coli оцените флуоресценцию и выполните реакцию на индол с использованием реактива Ковача (R008).
5. После завершения работы загрязнённые материалы стерилизуйте автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет порошка: от кремового до жёлтого.
Состояние: однородный, сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Приготовленная среда представляет собой прозрачный раствор светло-янтарного цвета без осадка.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 3,57 % м/об при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 4–24 ч.

Обозначения:

• — соответствующие номера WDCM.

— ранее название Enterobacter aerogenes.

Технические характеристики

• Назначение изделия: бульон.
• Масса: 500 г.
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере, в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Условия хранения

Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C. Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков. После каждого использования плотно закрывайте контейнер.

Ограничения применения

• Для получения достоверных результатов необходимо использовать хорошо изолированные колонии.
• Для подтверждения следует выполнять другие биохимические тесты в комплексе с данной методикой.

Требования безопасности

Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности в соответствии с установлен