HiMedia MV1042-500G MUG EC HiVeg бульон

Питательный микробиологический бульон HiMedia MV1042-500G MUG EC HiVeg бульон — сухая порошковая среда на растительной основе для флуорогенного выявления Escherichia coli в образцах воды и пищевых продуктов. HiMedia MV1042-500G применяется без добавок после восстановления в концентрации 37,0 г/л и стерилизации при 121 °C в течение 12–15 мин.

Назначение

MUG EC HiVeg Broth предназначен для выявления Escherichia coli в образцах воды и пищевых продуктов флуорогенным методом.

Состав

Состав на 1 л среды:

Конечный показатель pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Профиль продукта

Растительная основа, код MV

Модель среды: MV1042.

Компоненты растительного происхождения:

• гидролизат HiVeg;
• синтетическое моющее средство № I.

Животная основа, код M

Модель среды: M1042.

Компоненты животного происхождения:

• ферментативный гидролизат казеина;
• смесь желчных солей.

Отличие вариантов: в MUG EC HiVeg Broth используются растительные пептоны вместо животных пептонов; вариант M1042 содержит ферментативный гидролизат казеина и смесь желчных солей.

Восстановление среды

• Концентрация при восстановлении: 37,0 г/л
• Объём приготовленной среды из упаковки 500 г: 13,51 л
• pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2
• Добавка: отсутствует
• Стерилизация: 121 °C, 12–15 мин

Принцип действия и интерпретация

Среда приготовлена с использованием растительных пептонов вместо животных, что исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Бульон EC разработан Hajna и Perry и позднее модифицирован добавлением флуорогенного соединения MUG. MUG EC HiVeg Broth представляет собой модификацию этой рецептуры. Соединение MUG обеспечивает быстрое выявление Escherichia coli при наблюдении флуоресценции среды в ультрафиолетовом свете. MUG также позволяет выявлять анаэрогенные штаммы, которые могут не определяться обычным методом.

Фермент β-глюкуронидаза, присутствующий у Escherichia coli, гидролизует MUG с образованием флуоресцирующего конечного продукта — 4-метилумбеллиферона.

Функции компонентов среды:

• гидролизат HiVeg обеспечивает необходимые питательные вещества;
• лактоза является сбраживаемым углеводом;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• буферная система регулирует pH при ферментативном сбраживании;
• синтетическое моющее средство № I подавляет грамположительные бактерии, особенно виды Bacillus, и фекальные стрептококки.

В большинстве случаев активность β-глюкуронидазы проявляется в течение 4 ч, однако некоторые штаммы со слабой β-глюкуронидазной активностью требуют инкубации в течение ночи.

При наличии большого количества Proteus vulgaris возможно подавление газообразования Escherichia coli. Флуоресценция позволяет выявлять Escherichia coli в чистых или смешанных культурах.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 37 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки, содержащие перевёрнутые трубки Дюргема.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 12–15 мин и давлении 15 фунтов на кв. дюйм (примерно 0,103 МПа).

Условия хранения

• Сухая среда: при температуре ниже 30 °C
• Приготовленная среда: при температуре 2–8 °C

Контроль качества

Внешний вид порошка

Порошок жёлтого цвета, может иметь слегка зеленоватый оттенок; однородный, сыпучий.

Цвет и прозрачность раствора

Раствор жёлтого цвета, прозрачный, без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 3,7 % мас./об.: pH 6,9 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 4–24 ч.

Обозначение «+»: флуоресценция при длине волны 366 нм.

Технические характеристики

Метод анализа

Флуорогенное выявление основано на гидролизе 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронида (MUG) ферментом β-глюкуронидазой, продуцируемой Escherichia coli. Образующийся 4-метилумбеллиферон флуоресцирует при облучении ультрафиолетовым светом; при контроле качества флуоресценцию оценивают при 366 нм.