HiMedia MV086-500G Лактозный бульон Эйкмана, HiVeg

Питательная среда HiMedia MV086-500G Лактозный бульон Эйкмана, HiVeg — порошкообразный бульон с конечным pH 6,8 ± 0,2. Среда предназначена для выявления и дифференциации Escherichia coli среди других колиформных микроорганизмов по способности ферментировать лактозу с образованием газа; образцы — вода.

Назначение

Лактозный бульон Эйкмана, HiVeg применяется для выявления и дифференциации Escherichia coli среди других колиформных микроорганизмов на основании способности расти и выделять газ при ферментации лактозы.

• Тип изделия: бульон
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 500 г
• Тип продукта: HiVeg™
• Происхождение: без компонентов животного происхождения, растительная основа; содержит лактозу
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Тип образца: пробы воды

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Колиформными микроорганизмами называют лактозоферментирующие энтеробактерии, включая Escherichia coli и Enterobacter. Семейство Enterobacteriaceae включает большую группу грамотрицательных бактерий, обитающих в кишечном тракте теплокровных животных и составляющих основную часть микрофлоры человеческих фекалий.

Колиформные микроорганизмы легко выделяются и идентифицируются, поэтому используются как индикаторные организмы для контроля фекального загрязнения пищевых продуктов, воды и других образцов.

E.coli относится к распространённым микроорганизмам, участвующим в грамотрицательном сепсисе и эндотоксин-индуцированном шоке.

Эйкман описал метод селективного выделения E. coli из фекалий теплокровных и холоднокровных животных. Метод имел ограничения: после пересевов из положительных пробирок, инкубированных при 46 °C, не всегда удавалось получить рост, поскольку повышенная кислотность и высокая температура приводили к гибели культуры в течение 24–48 ч.

Перри и Хайна модифицировали исходный метод Эйкмана, снизив содержание углеводов и добавив фосфатный буфер. Это позволило проводить пересев E. coli после инкубации при 46 °C в течение 96 ч и более; pH среды при этом составлял 5,6 вместо 4,5 в среде Эйкмана.

Перри дополнительно модифицировал среду Эйкмана, применив лактозу для выделения E. coli. Среда также может использоваться для бактериологического анализа при контроле фильтрации воды.

Среда MacConkey HiVeg® с CV, NaCl, 0,005 % NR и 1,5 % агара приготовлена с использованием пептонов растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения, что исключает риски, связанные с BSE/TSE.

• Гидролизат HiVeg® № 1 и лактоза являются источниками энергии и углерода соответственно.
• E. coli ферментирует лактозу с образованием кислоты и газа.
• Образующийся газ улавливается в виде пузырьков в перевёрнутых трубках Дюргама.
• Фосфаты выполняют буферную функцию.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды.

Методика приготовления среды

1. Для стандартного приготовления суспендируйте 28,5 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При исследовании порций проб воды объёмом 10 мл используйте 57 г сухой среды на 1000 мл дистиллированной воды.
3. При необходимости нагрейте раствор для полного растворения среды.
4. Разлейте приготовленную среду по пробиркам с перевёрнутыми трубками Дюргама для улавливания газа.
5. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
6. Охладите среду до 45–50 °C.

Сбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с установленными руководствами и местными нормативами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Метод имеет ограничения, связанные с невозможностью получить рост после пересевов из положительных пробирок, инкубированных при 46 °C: повышенная кислотность и высокая температура могут привести к гибели культуры в течение 24–48 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 2,85 % масс./об. при 25 °C:

• pH: 6,8 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 6,60–7,00

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 45,5–46 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.
# Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон.
• Из-за гигроскопичности продукта при неправильном хранении возможно образование комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.