Питательная среда HiMedia MV080-500G Лаурилсульфатный HiVeg бульон (лаурил-триптозный) производства HiMedia — порошковый селективный бульон с содержанием лаурилсульфата натрия 0,100 г/л. Среда предназначена для обнаружения и количественного определения колиформных бактерий в воде, сточных водах, молочных и других пищевых продуктах; при подтверждении Escherichia coli используется газообразование при 44 °C и положительная реакция на индол.

Назначение

Лаурилсульфатный HiVeg бульон применяют для предполагаемого обнаружения и количественного определения колиформных бактерий в воде, сточных водах, молочных продуктах и других пищевых образцах.

Типы образцов:

• пищевые продукты и молочные образцы;
• образцы воды.

Среда может использоваться как альтернатива лаурил-триптозному бульону, разработанному Mallmann и Darby, для определения колиформных бактерий в воде, стоках и сточных водах методом наиболее вероятного числа (НВЧ), а также для обнаружения колиформных бактерий в пищевых продуктах.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Лаурил-триптозный HiVeg® бульон получают заменой триптозы на гидролизат HiVeg® № 1, благодаря чему среда не содержит рисков, связанных с BSE/TSE — губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями.

Колиформные бактерии относятся к семейству Enterobacteriaceae. Они способны расти в присутствии солей желчных кислот и образовывать кислоту и газ из лактозы в течение 48 ч при 37 °C. Для колиформных бактерий обычно характерна активность β-галактозидазы.

Включение лаурилсульфата натрия делает среду селективной для колиформных бактерий. Аэробные спорообразующие бактерии полностью подавляются. Среда также может обеспечивать более высокий колониальный индекс по сравнению со стандартными средами для подтверждающих методов; образование газа в среде служит не только предполагающим, но и подтверждающим тестом на наличие колиформных бактерий при рутинном исследовании воды.

Функции компонентов:

• гидролизат HiVeg® № 1 обеспечивает необходимые вещества для роста, включая соединения азота и углерода, сульфат и микроингредиенты;
• фосфаты калия образуют буферную систему;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 35,6 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте среду по пробиркам, содержащим перевёрнутые трубки Дюрхема.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм и температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление 15 фунтов на квадратный дюйм соответствует приблизительно 0,103 МПа.
5. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.

Методика проведения анализа

1. Для посевного материала объёмом 1 мл или менее используйте среду одинарной концентрации.
2. Для посевного материала объёмом 10 мл или более приготовьте среду двойной концентрации или среду в пропорциональном объёме.
3. После внесения посевного материала инкубируйте пробирки при 35–37 °C в течение 24–48 ч.
4. Из каждой пробирки, в которой наблюдается ферментация — первичная ферментация, — выполните пересев в две пробирки с лаурил-триптозным HiVeg® бульоном.
5. Одну пробирку инкубируйте при 35–37 °C, вторую — при 44 °C.
6. Если в пробирке, инкубируемой при 44 °C, ферментация наблюдается через 8–24 ч, выполните реакцию на индол с добавлением реактива Ковача.
7. Положительная реакция на индол в пробирке с бульоном, где при 44 °C образовался газ, указывает на присутствие Escherichia coli.
8. Если в пробирке, инкубируемой при 35–37 °C, через 24 ч ферментация отсутствует, предполагается, что первичная ферментация вызвана микроорганизмами, не относящимися к колиформным бактериям.

При хранении бульона при 2–8 °C среда может мутнеть или образовывать осадок; при комнатной температуре раствор должен снова стать прозрачным.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и местным нормативным требованиям. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения

1. Из-за различий в питательных потребностях некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
2. Для подтверждения необходимо дополнительно выполнить биохимические и серологические исследования.

Ожидаемые рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция 3,56 % масс./об. водного раствора при 25 °C.

• pH: 6,8 ± 0,2

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Ранее использовавшееся название: Enterobacter aerogenes.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Для сохранения рабочих характеристик использовать продукт в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Комплект поставки

• Лаурилсульфатный HiVeg бульон, 500 г.