HiMedia MV080-100G Лаурилсульфатный HiVeg бульон (лаурил-триптозный)

Сухая питательная среда HiMedia MV080-100G Лаурилсульфатный HiVeg бульон (лаурил-триптозный) для выявления и количественного учёта колиформных бактерий в воде, сточных водах, молочных и пищевых продуктах. Применяется в методе наиболее вероятного числа (НВЧ) и требует подтверждения положительных результатов биохимическими и серологическими тестами.

Назначение

Лаурилсульфатный HiVeg бульон предназначен для выявления и количественного учёта колиформных бактерий в воде, сточных водах, молочных продуктах и других пищевых образцах.

Состав

Формула среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Принцип действия и интерпретация результатов

Лаурил-триптозный HiVeg® бульон получают заменой триптозы на гидролизат HiVeg® № 1, благодаря чему среда не содержит рисков, связанных с BSE/TSE — губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями.

Среда может применяться как альтернатива лаурил-триптозному бульону, разработанному Mallmann и Darby и рекомендованному APHA и комитетом ISO для предварительного выявления колиформных бактерий в воде, стоках или канализационных водах методом наиболее вероятного числа, а также для выявления колиформных бактерий в пищевых продуктах.

Колиформные бактерии относятся к семейству Enterobacteriaceae. Эти микроорганизмы растут в присутствии желчных солей и образуют кислоту и газ из лактозы в течение 48 ч при 37 °C. Для колиформных бактерий обычно характерна активность β-галактозидазы.

Включение лаурилсульфата натрия делает среду селективной для колиформных бактерий. Аэробные спорообразующие микроорганизмы полностью подавляются. По данным производителя, среда также обеспечивает более высокий колиформный индекс по сравнению со средами для подтверждающих стандартных методов, а газообразование служит не только предварительным, но и подтверждающим признаком присутствия колиформных бактерий при рутинном анализе воды.

Гидролизат HiVeg® № 1 обеспечивает микроорганизмы необходимыми компонентами роста, включая соединения азота и углерода, сульфат и микроэлементы. Фосфаты калия образуют буферную систему, а хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Методика приготовления и проведения анализа

1. Для приготовления среды суспендируйте 35,6 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду по пробиркам, содержащим перевёрнутые трубки Дюрхема.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (примерно 0,10 МПа).
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Для посевной дозы 1 мл или менее используйте среду одинарной концентрации.
7. Для посевной дозы 10 мл или более приготовьте среду двойной концентрации либо среду в пропорциональном объёме.
8. После инокуляции инкубируйте пробирки при 35–37 °C в течение 24–48 ч.
9. Из каждой пробирки с признаками ферментации, то есть с первичной ферментацией, выполните пересев в две пробирки с лаурил-триптозным HiVeg® бульоном.
10. Одну пробирку инкубируйте при 35–37 °C, вторую — при 44 °C.
11. Если в пробирке, инкубированной при 44 °C, через 8–24 ч наблюдается ферментация, выполните индольную пробу с добавлением реактива Ковача.
12. Положительная индольная проба в пробирке с бульоном, в которой при 44 °C образовался газ, указывает на присутствие Escherichia coli.
13. Если в пробирке, инкубированной при 35–37 °C, через 24 ч ферментация отсутствует, считают, что первичная ферментация была вызвана микроорганизмами, не относящимися к колиформным бактериям.

При хранении бульона при 2–8 °C среда может мутнеть или образовывать осадок; при комнатной температуре бульон должен снова становиться прозрачным.

Типы образцов

• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.
• Образцы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Из-за различий в пищевых потребностях некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
2. Для подтверждения результата необходимо дополнительно выполнить биохимические и серологические тесты.

Ожидаемые характеристики и контроль качества

Эффективность среды ожидается при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность: прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция: водный раствор с массовой концентрацией 3,56 % при 25 °C.

pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.